氧环境对成骨细胞活性的影响

摘要：

目的：对比观察缺氧及缺氧再复氧环境下新生大鼠成骨细胞的细胞活性、凋亡率及基因表达的变化。方法取48 h内新生SD大鼠的颅骨，组织块法培养和纯化成骨细胞，采用茜素红染色、碱性磷酸酶染色行细胞形态学鉴定。以正常培养成骨细胞36 h为对照组（ A组）；取第3代成骨细胞，分别于缺氧24 h（ B组）、缺氧36 h（ C组）、缺氧24 h再复氧12 h（ D组）培养后，采用MTT法检测细胞活性、流式细胞技术检测细胞凋亡率；采用实时定量聚合酶链反应和免疫印迹技术检测下游基因胶原（ COL）Ⅰ、骨形态发生蛋白（ BMP）-2、核心结合因子（ RUNX）-2、转化生长因子（ TGF）β1 mRNA表达和相关蛋白的变化。结果缺氧及缺氧复氧环境下，成骨细胞活性降低， A 组为（99.1％±8.3％），B组为（90.9％±9.4％），C组（79.9％±8.7％），D组为（73.0％±8.2％），D组＜C组＜B组＜A组（F ＝37.886，P ＝0.000）；细胞凋亡率增加，A 组为（1.9％±1.3％），B 组为（16.3％±2.5％），C组（28.2％±4.2％），D组为（33.5％±3.6％），D组＞C组＞B组＞A组（F＝26.198，P＝0.000）；BMP-2、RUNX-2、Collagen type Ⅰ、TGF-β1 mRNA表达量降低，且D组＜C组＜B组＜A组（F＝13.082， P＝0.006；F＝7.088， P＝0.017；F＝6.857， P＝0.038；F＝51.368， P＝0.000）；BMP-2、RUNX-2、Collagen type Ⅰ、TGF-β1蛋白表达量降低，且D组＜C组＜B组＜A组（ F＝8.114， P＝0.013；F＝28.935， P＝0.000；F＝9.857， P＝0.007；F＝46.541， P＝0.000）。结论缺氧及缺氧再复氧环境会降低成骨细胞活性，增加细胞凋亡率，下调相关基因的表达。缺氧再复氧环境会加重缺氧状态下成骨细胞损伤。

关键词：成骨细胞、细胞低氧、大鼠、缺氧再复氧

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分类号：TQ1;TN1

资助基金：国家自然科学基金81341054；81171732；皖南医学院人才引进基金 YR201411Fund programNational Natural Science Foundation of China NSFC 81341054；81171732；Research Foundation for Talented Scholars of Wannan Medical College YR201411

在线出版日期：2017-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：217-222