mTOR-Cdc42信号通路对慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响
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10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2016.46.011

mTOR-Cdc42信号通路对慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

引用
目的 探讨雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)小鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬功能的影响.方法 40只小鼠按随机数字表法随机分为对照组、模型组各20只.模型组采用烟草烟雾暴露法建立慢阻肺模型;不连续密度梯度离心法分离AM.对照组AM分为健康对照组、雷帕霉素对照组、模型组AM分为慢阻肺组、雷帕霉素慢阻肺组,其中雷帕霉素对照组和雷帕霉素慢阻肺组AM培养基中加入终浓度10 nmol/L雷帕霉素干预24h;流式细胞术测AM吞噬荧光素标记大肠杆菌的能力;实时荧光定量PCR及Western印迹法测mRNA和蛋白;小G蛋白活性试剂盒测Cdc42活性;激光共聚焦显微镜观察细胞骨架.结果 慢阻肺组平均荧光强度(MFI)和吞噬荧光素标记大肠杆菌阳性细胞百分比(吞噬%)均显著低于健康对照组”4 060±590比9 190±988和(28.65±1.26)%比(67.50±4.56)%”;雷帕霉素慢阻肺组”4 856±762、(38.31±1.71)%”均显著高于慢阻肺组(均P<0.05).慢阻肺组mTOR mRNA、蛋白及活性(p-mTOR)均显著高于健康对照组(2.62±0.46、1.30±0.52、1.46±0.43比1.00±0.00、0.48±0.27、0.58±0.26);雷帕霉素慢阻肺组(1.40±0.36、0.90±0.66、0.92±0.28)均显著低于慢阻肺组(均P <0.05).慢阻肺组Cdc42 mRNA、蛋白及活性均显著高于健康对照组(2.56±0.50、1.61±0.37、0.46±0.09比1.00±0.00、0.67±0.22、0.30±0.07);雷帕霉素慢阻肺组(1.38±0.34、0.91±0.48、0.36±0.06)均显著低于慢阻肺组(均P<0.01).健康对照组及雷帕霉素对照组AM细胞骨架未见丝状伪足;慢阻肺组可见丝状伪足伸出杂乱;雷帕霉素慢阻肺组可见长伪足.基础状态、雷帕霉素干预后,mTOR和Cdc42 mRNA、蛋白及活性均与MFI呈负相关.结论 mTOR-Cdc42信号通路活化与慢阻肺小鼠AM细胞吞噬功能低下有关,其可能参与慢阻肺的发病.

肺疾病,慢性阻塞性、巨噬细胞,肺泡、他克莫司结合蛋白质类、细胞周期蛋白质类、吞噬作用

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2017-01-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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0376-2491

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2016,96(46)

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