内质网应激调控糖原合成酶激酶3β活性在小鼠急性肝衰竭致病中的作用

摘要：

目的：研究严重内质网应激介导糖原合成酶激酶3β（ GSK3β）活性在小鼠急性肝衰竭肝损伤病理机制中的作用。方法以C57BL／6小鼠为研究对象，腹腔注射D-氨基半乳糖（ D-GalN）和脂多糖（ LPS）诱导小鼠急性肝衰竭模型。动物实验分组：阴性对照组（ n＝10）、急性肝衰竭模型组（n＝18）、4-丁酸苯酯（4-PBA，内质网应激抑制剂）干预组（n＝18）和SB216763（GSK3β特异性抑制剂）干预组（n＝16）。检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）评价肝脏功能，观察肝脏组织病理变化评价肝脏损伤情况，免疫印迹方法检测肝脏组织中蛋白表达水平， GSK3β活性检测试剂盒检测肝脏组织中GSK3β活性改变，四甲基偶氮唑盐（ MTT）法检测细胞生存率。结果体内实验表明，在D-GalN／LPS诱导的急性肝衰竭过程中，内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（ GRP78）和特异性凋亡分子CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的表达逐渐升高，提示严重内质网应激被激活，同时GSK3β活性也逐渐升高。4-PBA抑制内质网应激可显著改善肝脏功能[ALT：（365.4±58.6）比（1094.5±201.5）U／L；AST：（555.1±60.8）比（1444.3±533.7）U／L，均P＜0.05]和病理损伤，此外，4-PBA还抑制急性肝衰竭小鼠肝脏中GSK3β的活性（2.6±0.3比4.6±1.3，P＜0.05）。进一步研究表明，抑制GSK3β活性能够下调CHOP和GRP78的表达而改善急性肝衰竭肝损伤。衣霉素诱导肝细胞凋亡的体外实验表明，抑制GSK3β活性能够促进细胞生存。结论在D-GalN／LPS诱导的急性肝衰竭过程中，严重内质网应激通过上调GSK3β活性而促进急性肝衰竭的发生和发展。

关键词：肝功能衰竭、急性、炎症、内质网应激、糖原合成酶激酶3β

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分类号：R61;R39

资助基金：国家“十二五”科技重大专项2012ZX10002004-006、2012ZX10004904-003-001、2013ZX10002002-006-001；国家自然科学基金面上项目81270532；北京市自然科学基金面上项目7162085；首都特色临床应用研究项目 Z121107001012167；北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养计划2013-3-075

在线出版日期：2016-09-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2734-2738