调控转录因子NF-κB信号通路对体外自然退变终板软骨细胞的影响

摘要：

目的 探讨终板软骨细胞体外自然退变模型中转录因子(NF)-κB信号通路表达变化及意义.方法 分离获取大鼠终板软骨细胞,体外培养建立终板软骨细胞自然退变模型.根据细胞传代次数分P2代细胞(空白对照组),P5代细胞(体外自然退变组)及NF-κB信号通路抑制组(细胞传代中加入Bay11-7082的P5代细胞).观察细胞形态学变化,甲苯胺蓝染色鉴定细胞表型,阿新蓝染色观察细胞外基质变化.实时聚合酶链反应检测各组细胞中SOX-9基因,Ⅱ型胶原,蛋白聚糖,人基质金属蛋白酶(MMP) 13的表达情况,核质分离及免疫印迹检测胞核与胞质中NF-κB信号通路相关蛋白P65、p-P65、IκBα、p-IκBα表达变化.结果 随着体外传代的进行终板软骨细胞表型逐渐丢失,阿新蓝染色可见细胞外基质减少,P5代细胞(体外自然退变组)较P2代细胞(空白对照组)SOX-9(P5/P2=0.488,P＜0.01)、蛋白聚糖(P5/P2=0.287,P＜0.01)、Ⅱ型胶原(P5/P2=0.182,P＜0.01)表达明显降低,NF-κB信号通路相关基因P65入核增加,胞质中p-IκBα增高,NF-κB信号通路相关基因MMP13 (P5/P2=1.324,P＜0.05)表达明显上升,NF-κB信号通路抑制组较P5代细胞(体外自然传代组)核内p-P65减少,胞内p-IκBα降低,NF-κB信号通路相关基因MMP13(Bay11-7082/P5=0.611,P＜0.05)表达降低,信号通路抑制组中Ⅱ型胶原(Bay11-7082/P5 =4.173,P＜0.01)、蛋白多糖(Bay11-7082/P5=2.732,P＜0.05)、SOX-9(Bay11-7082/P5=1.567,P＜0.05)等基因表达明显回升.结论 NF-κB信号通路在终板软骨细胞体外退变中发挥重要的调节作用,调控NF-κB信号通路可能会改善椎间盘退变.

关键词：NF-κB信号通路、终板软骨细胞、细胞退变、基质金属蛋白酶13

所属期刊栏目：96

分类号：S852.611;R733.71;Q513

在线出版日期：2016-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2182-2186