天然虾青素对血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制

摘要：

目的 观察天然虾青素(AST)对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响,并探讨其可能机制.方法 实验分为空白对照组、PDGF-BB组、PDGF-BB+ AST组、AST组.采用不同因素干预细胞后,采用锥虫蓝染色检测AST和(或)PDGF-BB对VSMCs的细胞毒性;采用细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)、流式细胞仪、实时荧光定量(Real-time)PCR检测AST对PDGF-BB诱导的细胞增殖的影响;酶标仪检测法检测AST对PDGF-BB诱导细胞产生活性氧(ROS)的影响;蛋白印迹法(WB)探讨其可能机制.结果 (1)细胞活性:实验浓度的AST和(或)PDGF-BB对VSMCs无毒性(均P＞0.05).(2)增殖作用:PDGF-BB可显著诱导VSMCs细胞增殖(2.5±0.3比1,P＜0.01),AST(5、10、25 μmol/L)与PDGF-BB联合干预则可呈浓度依赖性的抑制细胞增殖(均P＜0.01);对细胞周期的影响:AST可阻滞PDGF-BB诱导的G0/G1期细胞向S期过渡;与对照组相比,PDGF-BB处理后显著提高促进细胞周期蛋白依赖性激酶6、4(CDK6,CDK4)、细胞周期蛋白D1、E(CyclinD1,CyclinE)的表达(4.20±0.30、2.90±0.18、3.50±0.30、2.70±0.11比1,均P＜0.01),抑制细胞周期蛋白激酶抑制蛋白P21 (P21)的表达(0.52±0.03比1,P＜0.01),AST(25μmol/L)与PDGF-BB联合干预可逆转这种现象.(3)对ROS的作用:酶标仪结果显示,PDGF-BB可显著诱导细胞中ROS的产生(2.10±0.09比1,P＜0.01),AST(5、10、25 μmol/L)与PDGF-BB合用则可呈浓度依赖性的抑制这种现象(均P＜0.01).(4)细胞内信号通路:PDGF-BB刺激VSMCs 5、10、15min后显著诱导ERK1/2、p38、JNK的磷酸化,AST(25 μmol/L)与PDGF-BB共同干预时可显著降低PDGF-BB诱导的ERK1/2和P38的磷酸化水平.结论 AST通过抑制VSMCs从G0/G1期细胞向S期过渡抑制PDGF-BB诱导的细胞增殖,其机制可能与降低PDGF-BB诱导细胞产生的ROS以及其下游的ERK、p38信号通路的磷酸化有关.

关键词：虾青素、血小板源性生长因子、血管平滑肌细胞、增殖、信号通路

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在线出版日期：2016-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2031-2035