Notch1减轻心肌缺血再灌注损伤作用的研究

摘要：

目的 探讨Notch1减轻心肌缺血再灌注损伤作用的分子机制.方法 采用Notch1胞内结构域(N1ICD)慢病毒表达载体(Lv-N1ICD)及N1ICD慢病毒干扰载体(Lv-N1ICD-shRNA)分别感染H9c2心肌细胞,建立体外心肌缺血再灌注(H/R)、缺血预适应(IPC)及缺血后适应(IPost)模型,从而分为对照组、缺氧/复氧(H/R)组、缺氧/复氧+N1ICD感染(H/R+N1ICD)组、缺血预适应(IPC)组、缺血预适应+ N1ICD干扰(IPC+ N1ICD-shRNA)组、缺血后适应(IPost)组、缺血后适应+N1ICD干扰(IPost+ N1ICD-shRNA)组.采用凋亡检测试剂盒、活性氧(ROS)检测试剂盒分别检测细胞凋亡、细胞内ROS;采用免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化糖原合成酶激酶-3β/糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β/GSK-3β)的表达.结果 心肌细胞凋亡率在对照组、H/R组、H/R+ N1 ICD组、IPC组、IPC+ N1ICD-shRNA组、IPost组、IPost+ N1ICD-shRNA组分别为(5.34±1.70)％、(47.03 ±4.10)％、(33.89±12.25)％、(35.85 ±3.17)％、(51.12±8.22)％、(37.35±3.82)％、(47.90±3.08)％,差异有统计学意义(F=18.47,P＜0.05).心肌细胞ROS在对照组、H/R组、H/R+ N1ICD组、IPC组、IPC+ N1ICD-shRNA组、IPost组、IPost+ N1ICD-shRNA组分别为624.66±79.52、1 221.87±63.66、913.12±115.82、935.85±201.62、1 204.03±113.82、967.15±106.11、1 296.59±222.38,差异有统计学意义(F =8.77,P＜0.05);心肌细胞p-GSK-3β/GSK-3β比值在对照组、H/R组、H/R+ N1ICD组、IPC组、IPC+ N1ICD-shRNA组、IPost组、IPost+ N1ICD-shRNA组分别为0.58 ±0.12、0.62±0.20、1.24±0.09、1.16 ±0.12、0.72±0.15、1.16±0.12、0.75 ±0.12,差异有统计学意义(F=11.21,P＜0.05).结论 Notch1作为内源性心肌保护因子,通过促进GSK-3β磷酸化,抑制心肌细胞凋亡,减轻心肌细胞ROS形成,从而减轻心肌缺血再灌注损伤.

关键词：受体,Notch1、心肌缺血、再灌注损伤、适应,生物学、线粒体

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资助基金：国家自然科学基金81570262,81260024;江西省自然科学基金20152ACB20026 National Natural Science Foundation of China81570262,81260024;Natural Science Foundation of Jiangxi Province20152ACB20026

在线出版日期：2016-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1591-1596