微小RNA-21转染对人肺癌细胞株顺铂耐药性的影响及机制探讨

摘要：

目的 探讨微小RNA-21(miR-21)在肺癌化疗耐药中的作用及机制,为非小细胞肺癌多药耐药的逆转提供实验性及理论性依据.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测非小细胞肺癌顺铂敏感细胞株A549及耐药细胞株A549/DDP(原发A549/DDP细胞)中miR-21的表达差异.合成miR-21的干扰序列,以脂质体为载体转染A549/DDP细胞,下调细胞中miR-21表达水平;检测细胞对化疗药物顺铂敏感性的变化;流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡及细胞周期相关指标;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测生存素(Survivin)、周期蛋白D1(Cyclin D1)、表皮生长因子受体(EGFR)、多药耐药相关蛋白(MRP1)和脂蛋白受体相关蛋白(LRP)表达水平.结果 miR-21在原发A549/DDP细胞中表达水平是顺铂敏感细胞株A549的(522.3 ±31.6)％,差异有统计学意义(t=48.318,P＜0.01);miR-21表达下调后,A549/DDP细胞对顺铂的敏感性明显增加,半数抑菌浓度(IC5o)降低为(22.2±1.2) μmol/L,转染空载质粒对照组的IC50为(48.6±3.2) μmol/L,差异有统计学意义(t =5.608,P＜0.01).与转染空载质粒对照组相比,成功转染A549/DDP细胞组细胞凋亡率为(27.7±1.1)％,显著高于原发A549/DDP细胞的凋亡率(16.8±1.1)％,差异有统计学意义(t=10.183,P＜0.01).成功转染A549/DDP细胞组细胞周期G0/G1期比例为(37.5±1.2)％,显著低于原发A549/DDP细胞的G0/G1期比例(43.4±2.3)％,差异有统计学意义(t=8.202,P＜0.01),生存素表达水平是原发A549/DDP细胞的(71.7±4.3)％,差异有统计学意义(t=4.771,P＜0.01),Cyclin D1表达水平是原发A549/DDP细胞的(69.4±4.5)％,差异有统计学意义(t=5.162,P＜0.01),EGFR表达水平是原发A549/DDP细胞的(52.3±3.2)％,差异有统计学意义(t=8.042,P＜0.01),MRP1表达水平是原发A549/DDP细胞的(60.6±4.2)％,差异有统计学意义(t=6.641,P＜0.01),LRP表达水平是原发A549/DDP细胞的(72.9±3.8)％,差异有统计学意义(t=4.566,P＜0.01).结论 miR-21可能在非小细胞肺癌多药耐药中发挥着重要作用,可能与促进细胞凋亡、调控肿瘤耐药相关蛋白的表达有关,有望成为抑制非小细胞肺癌多药耐药的潜在治疗靶点.

关键词：癌、非小细胞肺、抗药性、肿瘤、微RNAs

所属期刊栏目：96

分类号：R734.2;R285;R979.1

在线出版日期：2016-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1454-1458