骨化三醇对哮喘小鼠气道重塑及气道上皮细胞凋亡的影响

摘要：

目的 观察骨化三醇对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道重塑及气道上皮细胞(AECs)凋亡的影响.方法 24只雌性清洁级Balb/c小鼠按随机数字表法均分为对照组、慢性哮喘组、骨化三醇干预组各8只:(1)慢性哮喘组:于第1、14天小鼠腹腔注射0.1ml致敏液[卵清白蛋白(OVA,20 μg)+氢氧化铝凝胶(50μl)],从第21天开始雾化吸入1％ OVA溶液10 ml进行激发,30 min/次,3次/周,连续8周;(2)骨化三醇干预组:OVA致敏和激发同慢性哮喘组,每次激发前30 min予以100 ng骨化三醇腹腔注射;(3)对照组:使用生理盐水代替OVA进行致敏及激发.末次激发后24h内处死小鼠,取左肺多聚甲醛固定后石蜡包埋切片,分别行HE染色、阿利辛兰-过碘酸雪夫(AB-PAS)染色、Masson染色、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学染色,图像分析软件测定支气管基底膜周径、管壁总面积及AB-PAS、Masson、α-SMA染色阳性面积,结果均以基底膜周径将其标准化.石蜡切片经末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测气道上皮细胞凋亡,B细胞淋巴瘤/白血病2 (Bcl-2)免疫组织化学染色法检测Bcl-2蛋白在气道上皮组织中的相对表达量.结果 慢性哮喘组、骨化三醇干预组小鼠出现慢性哮喘气道炎症及气道重塑典型改变.骨化三醇干预组管壁总面积及AB-PAS、Masson、α-SMA染色阳性面积与基底膜周径的比值分别为(14.12±2.13)、(3.72 ±0.57)、(4.31 ±0.65)、(3.27±0.46) μm2/μm,均显著低于慢性哮喘组的(19.24±1.70)、(5.23±0.90)、(7.63±1.55)、(5.40±0.69)μm2/μm而高于对照组的(7.79±1.01)、(0.05 ±0.03)、(1.37±0.25)、(1.40 ±0.24).μm2/μm(均P＜0.01).骨化三醇干预组气道上皮细胞凋亡指数显著低于慢性哮喘组而高于对照组[(14.89±1.75)％比(29.73±5.74)％、(0.45±0.38)％,均P＜0.01].骨化三醇干预组Bcl-2蛋白相对表达量显著高于慢性哮喘组而低于对照组(0.114±0.009比0.091±0.023、0.160±0.021,均P＜0.05).结论 骨化三醇可减轻慢性哮喘小鼠的气道重塑及气道上皮细胞凋亡;其减少哮喘小鼠气道上皮细胞凋亡的机制涉及机体对线粒体凋亡途径重要分子Bcl-2的调控.

关键词：哮喘、骨化三醇、气道重构、细胞凋亡

所属期刊栏目：95

分类号：R737.33;R562.25;R285.5

在线出版日期：2016-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3945-3949