10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2015.24.018
PinX1基因对鼻咽癌细胞顺铂化疗敏感性的影响及其机制
目的 探讨PinX1基因对鼻咽癌细胞顺铂化疗敏感性的影响及其机制.方法 采用慢病毒构建的pCDH-CMV-PinX1-copGFP质粒载体转染鼻咽癌细胞,构建含PinX1基因载体的鼻咽癌Lenti-PinX1-5-8F细胞,同时构建Lenti-Ctrl-5-8F细胞(将不含PinX1基因的空载体转染5-8F细胞获得)及5-8F细胞作对照.将上述鼻咽癌细胞依实验分为4组:实验组为Lenti-PinX1-5-8F细胞+顺铂组(含PinX1基因的Lenti-PinX1-5-8F细胞中加入顺铂药物),对照组为Lenti-PinX1-5-8F细胞组(含PinX1基因)、顺铂药物组(5-8F细胞中加入顺铂)及5-8F细胞组.分别采用荧光定量PCR、流式细胞术、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、小室技术、Western印迹法及药物敏感试验检测PinX1基因表达、端粒酶活性、鼻咽癌增殖抑制、与顺铂抗癌的协同作用及肺耐药相关蛋白(LRP)及B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)基因的表达,观察PinX1基因在鼻咽癌细胞中对顺铂化疗敏感性的影响及其机制.结果 Lenti-PinX1-5-8F细胞中端粒酶活性相对量均显著低于Lenti-Ctrl-5-8F细胞、5-8F细胞(0.146±0.004比0.967 ±0.016、1.000±0.034,均P<0.01).16 μg/ml的顺铂与PinX1基因联合能显著增强端粒酶活性下调后对鼻咽癌细胞的抑制作用.Lenti-PinX1-5-8F细胞+顺铂组的细胞增殖指数均显著低于Lenti-PinX1-5-8F细胞组、顺铂药物组、5-8F细胞组[(14.39±3.66)%比(32.97±3.00)%、(31.18±4.24)%、(47.19±4.19)%,均P<0.01].Lenti-PinX1-5-8F细胞中LRP、Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.64±0.14、0.57 ±0.12,均显著低于Lenti-Ctrl-5-8F细胞的0.84±0.19、0.81±0.16和5-8F细胞的0.83±0.35、0.78±0.27(均P<0.01).结论 PinX1基因能增强顺铂对鼻咽癌细胞的化疗敏感性,其作用有可能是通过下调鼻咽癌细胞端粒酶活性、抑制Bcl-2和LRP基因而实现的.
鼻咽肿瘤、化疗、PinX1基因、端粒酶
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R734.2;R392-33;R285.5
广东省自然科学基金9151051501000061
2015-07-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1951-1956