过氧化氢损伤原代皮质神经元中PPARγ的改变

摘要：

目的 在原代培养皮质神经元中,观察过氧化氢(H2 O2)损伤是否诱导了过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)的磷酸化修饰及活性改变,从调节PPARγ的角度探讨H2 O2的损伤机制.方法 体外原代培养SD大鼠皮质神经元,完全随机分为正常对照组、H2O2损伤组(分别给予250、500、750 μmol/L H2O2作用2h)、U0126(ERK1/2激活抑制剂)组(10 μmol/L U0126预处理30min后给予500 μmol/L H2O2作用2h),采用细胞形态学观察、MTT法测定细胞存活率、锥虫蓝染色测定细胞死亡率、Western印迹法检测PPARγ、p-PPARγ(磷酸化的PPARγ)蛋白表达水平及PPARγ的核移位(即PPARγ活性)的改变.结果 (1)与正常对照组相比,经不同浓度(250、500、750 μmol/L) H2O2损伤2h后,神经元相对存活率降低(74.8％±5.2％、53.6％±6.7％和26.5％±5.8％,均P＜0.05),死亡率增加(正常对照组6.6％±1.0％,H2 O2损伤组23.1％±2.8％、48.2％±4.1％、75.9％±4.4％,均P＜0.05).(2)与正常对照组相比,H2O2 500μmol/L损伤组神经元PPARγ蛋白表达无明显变化(正常对照组1.25±0.07,H2 O2损伤组1.16±0.08,t=1.44,P＞0.05),而p-PPARγ蛋白表达增加(正常对照组0.90 ±0.04,H2O2损伤组1.26±0.09,t=-6.48,P＜0.05).同时PPARγ胞质蛋白表达增加(正常对照组0.49±0.04,H2O2损伤组0.77±0.03,t=-10.35,P＜0.05),胞核蛋白表达下降(正常对照组0.76±0.03,H2 O2损伤组0.20±0.06,t=14.82,P＜0.05)(即核移位下降).(3)与H2 O2损伤组相比,抑制ERK1/2激活降低p-PPARγ蛋白表达水平(H2O2损伤组0.85±0.05,U0126组0.42±0.14,t =4.91,P＜0.05)、增加PPARγ核移位(胞质损伤组1.03±0.16,U0126组0.60±0.04,t=4.58,P＜0.05;胞核损伤组0.16±0.04,U0126组0.87±0.11,t=-10.41,P＜0.05),同时增加神经元存活率(70.8％±1.3％,P＜0.05),降低神经元死亡率(29.8％±3.4％,P＜0.05).结论 原代皮质神经元中,PPARγ的磷酸化参与了H2 O2的细胞损伤机制.

关键词：H2O2、PPARγ、磷酸化、皮质神经元

所属期刊栏目：95

分类号：R285.5;R743;R542.2

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;天津市科委重点项目

在线出版日期：2015-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1686-1690