血管内皮前体细胞通过旁分泌功能促进间充质细胞成骨分化

摘要：

目的 探讨血管内皮前体细胞(EPC)促进间充质细胞(MSC)成骨分化的机制.方法 分离、培养与扩增6～8周龄C57 BL/6小鼠EPC、MSC,提取血管内皮前体细胞的条件培养基(EPC-CM)并检测血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGFβ1)、血小板源性生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的水平;为探讨EPC和EPC-CM对MSC成骨分化的影响,实验分为MSC/EPC组和MSC组,并根据加入的EPC-CM浓度不同分为0 EPC-CM组、25％ EPC-CM组及50％ EPC-CM组,诱导14d后茜素红染色检测各组钙盐沉积情况;在50％血管内皮前体细胞条件培养基下,分别加入上述6个细胞因子的中和抗体,检测血管内皮前体细胞条件培养基中参与促进间充质细胞成骨分化的细胞因子.结果 血管内皮前体细胞表面抗原VEGFR2、CD34、CD133的阳性率分别为79.3％、79.5％和76.4％,并且能在基质胶上形成血管样结构;血管内皮前体细胞分泌VEGF、TGFβ1、PDGF、IGF-1、SDF-1、bFGF;MSC/EPC组矿化结节形成明显多于MSC组,钙盐半定量检测示MSC/EPC组吸光度(A)值大于MSC组A值(0.733±0.032与0.236±0.020,P＜0.001);50％ EPC-CM组矿化结节形成多于25％EPC-CM组,25％ EPC-CM组多于0 EPC-CM组;半定量分析显示50％ EPC-CM组A值高于25％EPC-CM组(0.637±0.028与0.336±0.024,P＜0.001),25％ EPC-CM组A值高于0 EPC-CM组(0.336±0.024与0.239±0.013,P=0.004);在50％血管内皮前体细胞条件培养基下,加入VEGF、TGFβ1、IGF-1抗体的3组矿化结节相对于PBS组明显减少,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 血管内皮前体细胞可能通过分泌VEGF、TGFβ1、IGF-1促进间充质细胞成骨分化.

关键词：血管内皮前体细胞、骨髓间充质细胞、血管内皮生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子1

所属期刊栏目：95

分类号：R543;R743.33;R457.7

资助基金：国家自然科学基金;人社部留学回国人员科技活动项目;科技支疆项目

在线出版日期：2015-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1253-1257