脾脏CD4+ T细胞组蛋白乙酰化修饰与NOD小鼠糖尿病肾病进展的关系

摘要：

目的 探讨脾脏CD4+ T细胞组蛋白乙酰化修饰与非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠糖尿病肾病发生及进展的关系.方法 SPF级雌性NOD小鼠24只,8周龄,随机分为4组,检测12、18、24、30周龄小鼠的随机血糖,酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测尿白蛋白和尿肌酐.分离脾脏CD4+ T细胞,H3、H4乙酰化试剂盒检测CD4+ T细胞H3、H4总体乙酰化水平,实时定量PCR检测组蛋白乙酰化相关修饰酶的mRNA水平,Western印迹法验证实时定量PCR筛选出的阳性基因.结果 与12周龄NOD小鼠相比,24和30周龄鼠血糖升高[(18.1±6.3)、(20.7±7.5) mmol/L比(7.2±3.1) mmol/L],尿白蛋白/肌酐比值升高[(4.04±1.54)、(8.11±1.77)mg/g比(2.12±0.56) mg/g],脾脏CD4+ T细胞H3总体乙酰化水平降低[(0.068±0.023)、(0.043±0.017)比(0.127±0.036)],H4总体乙酰化水平降低[(0.058±0.022)、(0.041±0.019)比(0.082±0.032)],均P＜0.05.在组蛋白乙酰化修饰酶谱中,与12周龄NOD小鼠相比,24和30周龄鼠组蛋白乙酰转移酶P300的mRNA水平下降[(15.53±6.31)、(13.76±3.62)比(22.94±7.40)],P300/CBP相关因子(PCAF)的mRNA水平也降低[(3.21±0.81)、(2.74±0.36)比(5.31±0.73)],而HDAC5mRNA及蛋白表达水平升高(均P＜0.05).24和30周龄中已发病的NOD小鼠H3(r=-0.590,P=0.043)、H4(r=-0.702,P=0.011)乙酰化水平与尿白蛋白/肌酐比值呈负相关,HDAC5表达水平与尿白蛋白/肌酐比值呈正相关(r =0.673,P=0.016).结论 随着NOD小鼠周龄及肾脏损伤的进展,其脾脏CD4+ T细胞总体H3、H4乙酰化水平降低,组蛋白去乙酰化酶HDAC5表达水平升高.CD4+ T细胞中HDAC5的异常升高与NOD小鼠肾脏损害相关.

关键词：小鼠、近交NOD、组蛋白脱乙酰基酶类、组蛋白乙酰化、尿白蛋白/肌酐比值

所属期刊栏目：95

分类号：R73;R692;R587.1

资助基金：国家自然科学基金;高等学校博士学科点专项科研基金;湖南省自然科学基金;中央高校青年教师助推专项;湖南省发改委项目

在线出版日期：2015-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1061-1065