10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2014.42.005
骨髓间充质干细胞来源exosome对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSC)来源外泌体(exosome)对大鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及机制.方法 原代分离、培养、鉴定大鼠BM-MSC.提取BM-MSC来源exosome,使用电镜观察exosome,并检测其表面CD63表达.构建雄性SD大鼠IRI模型,随机数字表法分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、MSC处理组(IR+ MSC组)、MSC来源exosome处理组(IR+ MSC-ex组)、成纤维细胞来源exosome处理组(IR+F-ex组),每组6只大鼠.检测各组大鼠血清肌酐和尿素氮水平,HE染色观察肾脏组织形态学改变,TUNEL染色评价细胞凋亡,RT-PCR检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平,Western印迹法检测肾组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspases-3)表达水平.结果 (1)成功分离培养大鼠BM-MSC,其表面高表达CD29、CD44,低表达CD34,可成功诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞;(2)透射电镜下观察鉴定exosome,其表面标志CD63表达阳性;(3)与IR组相比,IR+ MSC组、IR+ MSC-ex组血肌酐、尿素氮均显著降低,病理损伤明显减轻,凋亡细胞数减少,部分炎症因子表达降低,促凋亡蛋白caspase-3表达减少(IR组:4 310±616,IR+ MSC组:2 569±530,IR+ MSC-ex组:3 144±343,均P<0.05).结论 大鼠BM-MSC来源exosome对大鼠肾脏IRI具有保护作用,可降低炎症和凋亡水平.
再灌注损伤、肾、骨髓间充质干细胞、外泌体、炎症
94
R737.31;R329.24;R681.2
国家自然科学基金;上海市科委科研计划;上海市科委科研计划
2015-01-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
3298-3303