Klotho蛋白对人脐静脉内皮细胞增殖迁移黏附及血管内皮生长因子表达的影响

摘要：

目的 研究抗衰老Klotho蛋白在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移、黏附能力中的作用及对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 采用不同浓度的Klotho蛋白(0.1、1、10 nmol/L)处理HUVEC24h,同时设置空白对照组、阳性对照VEGF组(10 nmol/L)和AKT信号通路抑制组(10 nmol/L Klotho蛋白+AKT抑制剂).通过MTT方法、划痕实验、Transwell方法、细胞黏附实验分别检测Klotho蛋白对HUVEC细胞的增殖、迁移、黏附能力的影响;并通过蛋白印迹(Westernblot)检测Klotho蛋白对HUVEC中VEGF表达的诱导作用.结果 MTT方法检测0.1、1、10 nmol/LKlotho蛋白组A值与空白对照组(0.59±0.03)相比,分别增加0.63±0.03、0.71±0.04、0.80±0.04,差异有统计学意义(F=9.32,P＜0.05);划痕实验0.1、1、10 nmol/L Klotho蛋白组细胞迁移率与空白对照组(9.40 ±2.07)％相比,分别增加(12.28±0.62)％、(31.66±1.50)％、(36.69 ±0.79)％,差异有统计学意义(F=9.50,P＜0.05);Transwell方法发现与空白对照组细胞迁移数(80.13±12.19)相比,0.1、1、10 nmol/L Klotho蛋白组增加95.88±9.54、143.13 ±7.83、178±12.77,差异有统计学意义(F=11.51,P＜0.05);细胞黏附实验0.1、1、10 nmol/L Klotho蛋白组和空白对照组细胞的黏附数分别为59.60±5.13、78.40 ±7.16、114.60±5.55和49.40±6.23,差异有统计学意义(F=9.75,P＜0.05);Western blot检测发现Klotho蛋白同样能够诱导VEGF表达,与空白对照组表达比值(0.35±0.08)相比,0.1、1、10 nmol/L Klotho蛋白组增加0.46±0.02、0.71 ±0.12、0.81 ±0.16,差异有统计学意义(F=8.95,P＜0.05).结论 Klotho蛋白能促进HUVEC的增殖、迁移、黏附能力,显著诱导VEGF的表达,并且其发挥功能与AKT信号通路有关.

关键词：内皮细胞、细胞增殖、细胞迁移分析、血管内皮生长因子类

所属期刊栏目：94

分类号：R737.9;R285.5;R363.121

资助基金：国家自然科学基金81070168

在线出版日期：2014-09-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2207-2211