过氧化物酶体增殖物激活受体α对小鼠急性肝衰竭的作用与机制

摘要：

目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α（ PPARα）对D-氨基半乳糖（ D-GalN）联合脂多糖诱导的小鼠急性肝衰竭（ALF）的作用与机制。方法将C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为对照组、ALF组、WY14643组、3-MA＋WY14643组、对照小干扰RNA（ siRNA）＋WY14643组、自噬相关基因ATG7 siRNA（siAtg7）＋WY14643组，每组8只。通过腹腔注射溶于生理盐水中的D-GalN （700 mg/kg）联合脂多糖（10μg/kg）构建小鼠ALF模型。 WY14643作为PPARα的选择性激动剂于造模前2 h以6 mg/kg通过尾静脉注射；3-MA作为自噬抑制剂于造模前2 h以10 mg/kg通过尾静脉注射；siAtg7作为自噬抑制剂于造模前48 h以50μmol· L-1· kg-1通过尾静脉注射；对照siRNA于造模前48 h以50μmol· L-1· kg-1通过尾静脉注射。在D-GalN联合脂多糖注射造模后6 h麻醉小鼠取血，获取肝组织并迅速提取mRNA。组织病理学分析及血清转氨酶活性测定观察肝组织损伤的严重程度；实时定量PCR检测自噬相关基因ATG5、ATG7、溶酶体相关膜蛋白1（LAMP1）及肿瘤坏死因子（ TNF）-α、白细胞介素（ IL）-1β、IL-6、趋化因子配体（ CXCL）-1、CXCL-10的mRNA表达；蛋白质印迹检测自噬相关蛋白LC3、ATG5、ATG7、LAMP1的表达。结果与ALF组相比，WY14643组小鼠肝小叶结构较完整，部分肝细胞呈气球样变，小叶内及汇管区炎细胞浸润不明显，血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平较低[（486±56）比（2705±423） U/L，（795±115）比（3709±820）U/L，均P＜0.05]，自噬相关基因LAMP1和蛋白表达更高（mRNA：4.28±0.57比2.67±0.43，P＜0.05）；与WY14643组相比，3-MA＋WY14643组和siAtg7＋WY14643组肝细胞呈大片状坏死，肝索解离，肝小叶结构无法辨认，汇管区及坏死区可见大量中性粒细胞和淋巴细胞等炎细胞浸润，血清ALT、AST水平更高[（2563±576）、（2148±221）U/L和（3474±858）、（3305±632）U/L，均P＜0.05]，促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6及趋化因子CXCL-1、CXCL-10的mRNA表达更多（均P＜0.05）。结论 PPAR α可通过促进细胞自噬减轻炎症反应对D-GalN联合脂多糖诱导的小鼠ALF产生保护作用，PPAR α可能成为临床上防治ALF的一个新的、重要的靶点。

关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体、肝功能衰竭、急性、自噬、炎症

分类号：R5 ;R3

资助基金：国家“十二五”科技重大专项2012ZX10002004-006

在线出版日期：2014-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2059-2063