腺苷对人结直肠癌细胞hMLH1基因甲基化的影响

摘要：

目的 探讨腺苷对人结直肠癌SW480细胞hMLH1基因甲基化的影响.方法 分别以0、1.5、3.0、4.5 mmol/L的腺苷干预SW480细胞72 h后,采用亚硫酸氢盐测序(BSP)法检测hMLH1基因启动子区CpG岛甲基化情况、反转录PCR法检测hMLH1 mRNA的表达、Western印迹法检测hMLH1蛋白的表达、采用流式细胞术检测细胞凋亡率;分别以0、1.5、3.0、4.5 mmol/L的腺苷干预SW480细胞24、48、72、96 h后通过四甲基偶氮唑盐(MTr)法检测各组细胞活力.结果 腺苷干预后1.5、3.0、4.5 mmol/L各组甲基化程度分别为65％±4％、45％±11％和16％±4％,均明显低于对照组(80％±4％,均P＜0.01);hMLH1 mRNA转录水平、蛋白表达水平、细胞凋亡水平均明显高于对照组(0.230±0.032、0.359±0.029和0.570±0.019比0.079±0.010,0.353±0.016、0.654±0.018和0.854 ±0.014比0.126±0.016,11.9％±0.6％、20.0％±1.8％和35.8％±1.8％比3.9％±1.4％,均P＜0.01).MTT法显示不同浓度腺苷干预细胞后,各组细胞活力均明显低于对照组(均P＜0.05),有一定的时间-剂量依赖性.结论 腺苷可逆转hMLH1启动子区异常甲基化状态,使hMLH1表达增加,抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡.

关键词：结直肠肿瘤、腺苷、甲基化、细胞凋亡、基因、hMLH1

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分类号：R735.3;R541;R282.710.5

资助基金：重庆市自然科学基金cstc2012jjA10063

在线出版日期：2014-06-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1261-1264