VEGF165和SDF-1双基因共表达腺病毒载体的构建及其在大鼠缺血脑组织中的表达

摘要：

目的 构建血管内皮生长因子(VEGF)165与基质细胞衍生因子 (SDF)-1双基因共表达腺病毒载体Ad5-VEGF165-IRES-SDF-1,并观察其在缺血大鼠脑组织中的共表达情况.方法 将VEGF165和SDF-1基因通过内部核糖体进入位点(IRES)进行定向连接,以同源重组的形式构建双基因共表达重组穿梭质粒pDC316-VEGF165-IRES-SDF-1,将其与骨架质粒pBHGlox_E1以脂质体转染HEK293细胞,获得有感染能力的重组腺病毒颗粒,经多轮扩增后获得纯化的腺病毒载体Ad5-VEGF165-IRES-SDF-1;以线栓法构建大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,并以立体定向微量注射的方法将构建的病毒载体注入大鼠侧脑室,以RT-PCR和免疫印迹法观察其介导VEGF165和SDF-1基因在缺血脑组织中的共表达情况.结果 PCR、双酶切和基因测序等结果显示,重组质粒和腺病毒载体构建正确,并能够介导VEGF165和SDF-1两种基因在缺血的大鼠脑组织内共表达.结论 成功构建了携带VEGF165和SDF-1双基因的腺病毒载体Ad5-VEGF165-IRES-SDF-1,Ad5-VEGF165-IRES-SDF-1可以介导VEGF165和SDF-1双基因在缺血大鼠脑组织内共表达.

关键词：血管内皮生长因子165、基质细胞衍生因子-1、腺病毒载体、内部核糖体进入位点、脑缺血

所属期刊栏目：94

分类号：R743.33;Q78;S828.2

资助基金：国家自然科学基金;山东省自然科学基金

在线出版日期：2014-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：544-548