抗BP180NC16A IgE ELISA检测方法的建立

摘要：

目的 建立抗BP180NC16A IgE抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,评价其在大疱性类天疱疮(BP)诊断中的意义.方法 采用pGEX-2T原核表达GST-BP180NC16A融合蛋白,并用谷胱甘肽亲和层析法进行纯化.采用棋盘滴定法确定抗原包被浓度,明确二抗及待测标本最佳稀释度,确定最佳实验条件.对2011年2月至2012年10月就诊于北京协和医院的56例BP患者、24名健康对照以及18例天疱疮、1例Stevens-Johnson综合征(SJS)患者血清进行检测,根据受试者工作特征(ROC)曲线确定最优阳性界值并评价其敏感度和特异度.结果 确定抗原包被浓度为500 μg/ml、酶标二抗最佳稀释倍数为1∶1000,血清标本采用原液及1∶10为最佳实验条件.根据ROC曲线判断最优阳性界值为0.549,实验的敏感度为71.4％、特异度为100％.天疱疮和SJS患者血清中此抗体均为阴性.结论 抗BP180NC16A IgE抗体检测方法具有较高的特异度以及相对较高的敏感度,在BP的诊断及发病机制的研究中具有重要意义.

关键词：类天疱疮、大疱性、免疫球蛋白E、酶联免疫吸附测定、抗BP180NC16A

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分类号：S852.43;R714.626;R392.11

资助基金：国家自然科学基金;新世纪优秀人才支持计划

在线出版日期：2013-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2244-2247