mTOR信号通路在乳腺癌拉帕替尼耐药细胞系中的作用

摘要：

目的 建立乳腺癌拉帕替尼耐药细胞系,探讨雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在其中的作用.方法 拉帕替尼逐步增加剂量诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞构建耐药细胞系rMDA-MB-231；四甲基偶氮唑盐(MTT)细胞毒实验检测拉帕替尼对细胞的生长抑制作用；Western印迹检测蛋白的表达改变；Lipofectin 2000转染小分子双链RNA干扰序列沉默rMDA-MB-231细胞mTOR基因的表达；异硫氰酸荧光素(FITC)-膜联蛋白V和碘化丙啶双染流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化.结果 MTT细胞毒实验结果显示拉帕替尼对MDA-MB-231和rMDA-MB-231细胞的半数抑制率(IC50)值分别为(6.1±0.6)和(34.9±2.7)μmol/L(P ＜0.01),耐药5.68倍(P＜0.01).Western印迹检测显示rMDA-MB-231细胞中p-mTOR蛋白的表达水平明显高于MDA-MB-231细胞.mTOR靶向小干扰RNA (siRNA)特异性的下调了rMDA-MB-231细胞中mTOR的表达.对照组、阴性RNA干扰对照组、mTOR特异性RNA干扰组分别在20 μmol/L拉帕替尼作用48 h后,细胞的凋亡率分别为:13.4％±2.5％、14.2％±2.8％、34.6％±5.8％,对照组和mTOR特异性RNA干扰组之间差异有统计学意义(P＜0.01),对照组和阴性对照之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乳腺癌拉帕替尼耐药细胞rMDA-MB-231出现了mTOR信号通路的激活,siRNA干扰mTOR基因表达可显著提高拉帕替尼对rMDA-MB-231致凋亡作用,为拉帕替尼耐药的防治和临床用药的选择提供了理论依据.

关键词：乳腺肿瘤、抗药性,肿瘤、mTOR信号通路、拉帕替尼

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在线出版日期：2013-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1915-1917