APPL1介导瘦素对C2C12细胞GSK-3β活性的影响

摘要：

目的 探讨瘦素对小鼠C2C12细胞内GSK-3β活性的作用及其作用机制.方法 体外培养C2C12细胞,经3d分化诱导成肌管细胞,对已分化的C2C12细胞,瘦素(100 nmol/L)分别处理0、5、15及30 min,利用Western印迹法检测GSK-3β的表达及Ser-9磷酸化水平；免疫共沉淀方法(CO-IP)观察在有无瘦素作用的情况下,APPL1-瘦素受体-GSK-3β之间的相互作用关系；在APPL1基因沉默的C2C12细胞内,观察此情况下GSK-3β的表达及Ser-9磷酸化水平；在过表达GSK-3β或抑制其活性的情况下,观察APPL1的表达及Ser-401磷酸化水平.结果 (1)瘦素呈时间依赖性刺激C2C12细胞GSK-3β Ser-9磷酸化水平升高,其中瘦素处理30 min组较对照组高4.08倍(P＜0.01)；(2)在C2C12细胞内APPL1与瘦素受体及GSK-3β共结合,且在瘦素作用下APPL1-GSK-3β结合能力更强；(3)在APPL1表达沉默时,GSK-3β Ser-9磷酸化水平与对照组相比显著低；(4)GSK-3β可刺激C2C12细胞APPL1 Ser-401位点磷酸化.结论 瘦素通过刺激C2C12细胞GSK-3β Ser-9磷酸化的途径促进肌糖原合成,其作用是通过APPL1直接与瘦素受体及GSK-3β结合来介导的,GSK-3β反过来可刺激APPL1 Ser-401位点磷酸化.

关键词：瘦素、成肌细胞、骨骼肌、糖原合成酶激酶3、APPL1、瘦素受体

所属期刊栏目：93

分类号：R73;R394.2;G804.7

资助基金：国家自然科学基金;上海市糖尿病重点实验室项目

在线出版日期：2013-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1432-1436