角质细胞生长因子噬菌体活性肽的构建及其对表皮细胞增殖的作用

摘要：

目的 构建展示角质细胞生长因子(KGF)噬菌体活性肽,检测其促表皮细胞增殖的作用.方法 选择4个KGF序列,设计引物；用反转录-PCR法获得3个KGF序列(P1、P2和P4),直接合成1个KGF序列(P3)；将KGF序列亚克隆至噬菌粒pComb3中；用噬菌体展示技术,将KGF基因片段展示于噬菌体表面；用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测KGF噬菌体活性肽促表皮细胞增殖的作用,测定其在570 nm的吸光度(A)值,用免疫荧光法检测其细胞亲和力.结果 获得4种KGF基因,构建在噬菌粒pComb3中；通过噬菌体展示技术将其表达于噬菌体的表面.MTT检测的吸光度(A)值结果显示阴性对照组(0.293±0.017)与KGF对照组(0.520±0.043)及4种KGF噬菌体活性肽组(P1 ～ 4) (0.469±0.057、0.441±0.048、0.438±0.035、0.446±0.037)间差异均有统计学意义(均P＜0.01),免疫荧光检测结果显示KGF和4种KGF噬菌体活性肽与表皮细胞具有较好的亲和力.结论 构建展示的KGF噬菌体活性肽能够显著促进表皮细胞增殖.

关键词：细菌噬菌体、肽库、角质细胞生长因子、表皮细胞

所属期刊栏目：93

分类号：R318.08;R737.9;O648.17

资助基金：国家自然科学基金;北京市自然科学基金;山东省自然科学基金

在线出版日期：2013-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1058-1062