蛋白酶体抑制对黑素细胞酪氨酸酶表达及输出的影响

摘要：

目的 明确蛋白酶体抑制对黑素细胞酪氨酸酶表达及输出的影响.方法 Western印迹检测8例白癜风患者和4名健康对照皮肤组织26S蛋白酶体水平.蛋白酶体抑制剂(lactacystin)处理黑素细胞后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定黑素细胞活性,检测蛋白酶体活性,电镜观察黑素细胞内质网形态,激光共聚焦观察酪氨酸酶与内质网标志蛋白的共定位表达,Western印迹分析26S蛋白酶体和酪氨酸酶表达水平.结果 白癜风患者皮损部位26S蛋白酶体表达水平(1.05±0.40)显著低于正常表皮部位(1.82±0.88)和健康对照(1.88±0.16) (P ＜0.05),但后二者间差异无统计学意义(P＞0.05).与未处理组相比,10 μmol/Llactacystin处理12h后对黑素细胞开始有显著抑制作用(细胞活性吸光度值:0.999±0.110比1.372±0.127,P＜0.05),蛋白酶体活性显著低于未处理组(0.234±0.019比1,P＜0.01).lactacystin处理组内质网相对膨胀值显著高于未处理细胞(1.91±0.17比1.17±0.11,P＜0.01).lactacystin处理组酪氨酸酶与内质网标志蛋白共定位于内质网,而未处理组酪氨酸酶能有效输出于内质网.与未处理组相比,lactacystin处理组酪氨酸酶表达水平显著下降(146±10比269±8,P＜0.01),且酪氨酸酶活性也显著下降(0.159±0.017比0.221±0.019,P＜0.01).结论 白癜风患者皮损处26S蛋白酶体水平显著下降,蛋白酶体抑制引起黑素细胞内质网膨胀,影响酪氨酸酶有效输出于内质网及表达.

关键词：白癜风、黑素细胞、一元酚单氧酶、蛋白酶体

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资助基金：国家自然科学基金30800563、81071294;浙江省自然科学基金Y2101132、Z2100973;杭州市科技发展计划20092133W04

在线出版日期：2013-05-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：123-127