10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2012.48.014
人肝癌细胞系SMMC-7721肿瘤干细胞筛选及鉴定
目的 探讨采用一种新型高效的肝癌干细胞分离方法,并对获得的肝癌干细胞进行鉴定.方法 应用无血清肿瘤干细胞培养基,悬浮培养SMMC-7721形成克隆,将悬浮细胞收集后裸鼠皮下接种,并予顺铂干预,取耐药细胞继续悬浮培养获得克隆,分别采用定量PCR、免疫荧光法和流式细胞法检测干细胞和肿瘤干细胞标志的表达情况.结果 在肿瘤干细胞培养基和顺铂的双重筛选下,SMMC-7721能有效形成悬浮生长的细胞克隆.检测结果提示,与普通肝癌细胞相比,获得的干细胞克隆高表达多种干细胞标志NANOG、OCT-4、SOX-2、Notch和肿瘤干细胞标志CD24(90.0%)、CD133(6.1%)、CD90(4.8%),其中尤以CD24最为明显,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 无血清体外培养+体内增殖+耐药筛选相结合是一种能有效分离纯化肿瘤干细胞的新方法,可从SMMC-7721中分离出具有干细胞特征并高表达CD24的肝癌干细胞克隆.
癌、肝细胞、肿瘤干细胞、耐药性
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R735.7;R329;TS201.3
浙江省中医药科技计划2010ZA111
2013-02-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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