10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2012.46.016
脂肪酸结合蛋白抑制剂在小鼠体外对胰岛β细胞遭受巨噬细胞介导的炎症损伤的保护作用
目的 探讨脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)抑制剂对胰岛β细胞遭受巨噬细胞介导的炎症损伤的保护作用.方法 采用Transwell小室构建小鼠胰岛细胞株MIN6和巨噬细胞株RAW264.7的共培养系统.在共培养前2h,在RAW264.7巨噬细胞中分别加入A-FABP的抑制剂(5μmol/L).共培养48 h后,用实时定量PCR和Western印迹法检测RAW264.7巨噬细胞上Toll样受体(TLR)4和脂肪酸结合蛋白(A-FABP)的表达,用ELISA方法检测细胞上清液中白细胞介素(IL-1)β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度,此外,用含葡萄糖3、30 mmol/L的碳酸氢钠缓冲液(KRBB液)孵育MIN6胰岛细胞1h,用ELISA方法测定细胞上清液中胰岛素的浓度.结果 (1)共培养后,巨噬细胞上TLR4和A-FABP的表达水平以及细胞上清液中IL-1β和TNF-α的浓度均明显高于巨噬细胞对照组(均P <0.05);(2)共培养后,高糖刺激的胰岛素分泌水平明显低于胰岛细胞对照组”(16.0±2.2)比(41.1±6.6)ng/ml,P<0.05”;A-FABP的抑制剂干预后再共培养,巨噬细胞上TLR4和A-FABP的表达水平以及细胞上清液中的IL-1β和TNF-α的浓度均显著低于共培养对照组(均P<0.05),高糖刺激胰岛β细胞的胰岛素分泌水平显著高于共培养对照组”(31.4±3.3)比(16.0±2.2)ng/ml,P<0.05”.结论 (1)巨噬细胞与胰岛β细胞共培养后,可活化炎症通路,释放炎症因子,损伤胰岛β细胞的胰岛素分泌能力;(2) A-FA BP的抑制剂可抑制巨噬细胞和胰岛β细胞共培养后炎症通路的活化和炎症因子的释放,从而阻止胰岛β细胞胰岛素分泌能力的下降.
脂肪酸结合蛋白质类、共同培养技术、巨噬细胞、胰岛β细胞
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湖南省科学技术厅科技计划 2011FJ3019
2013-02-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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