重型再生障碍性贫血患者CD8+HLA-DR+效应T细胞调控因素的研究

摘要：

目的 体外研究重型再生障碍性贫血(SAA)患者骨髓CD8+ HLA-DR+T细胞的调控因素,进一步探讨该群细胞在SAA免疫发病中的地位.方法 选取2011年7月至2012年3月收治的13例初治SAA患者.免疫磁珠分选SAA患者骨髓CD8+ HLA-DR+T细胞后分为3组:白细胞介素2(IL-2)组(加入IL-2终浓度分别为0、0.1、1、10、100、1000 U/L)；环孢素A(CsA)组(在IL-2浓度基础上每孔加入终浓度为400ng/ml的CsA)；IL-2受体拮抗剂组(在IL-2浓度基础上每孔加入终浓度为8 μg/ml IL-2受体拮抗剂),孵育72 h后四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况.Ficoil法分离SAA患者的骨髓单个核细胞后分为3组:CsA组(加入终浓度为400 ng/ml的CsA)、IL-2组(加入终浓度为100 U/ml的IL-2)和对照组(不加任何刺激物),孵育18 h后加入佛波酯等活化4h,流式细胞仪检测CD8+ HLA-DR+T细胞胞内肿瘤坏死因子β(TNF-β)蛋白的表达水平.结果 IL-2浓度为10、100、1000 U/L时IL-2组CD8+ HLA-DR+T细胞增殖[吸光度(A)值]分别为0.36 ±0.12、0.41±0.12、0.46±0.14,明显高于未加IL-2的空白对照(0.23±0.11),亦高于同等IL-2浓度下的CsA组(0.18±0.05、0.19±0.00、0.20±0.04)和IL-2受体拮抗剂组(0.18±0.05、0.17±0.04、0.18±0.03,均P＜0.05)；而CsA组和IL-2受体拮抗剂组间差异无统计学意义(P＞0.05).IL-2组CD8+ HLA-DR+T细胞胞内TNF-β蛋白表达(64％±25％)明显高于对照组(46％±22％)；CsA组(27％±20％)明显低于对照组(均P＜0.05).结论 IL-2不仅显著刺激SAA患者CD8+ HLA-DR+T细胞体外增殖,还可促进该群细胞分泌高水平的TNF-β,而CsA和IL-2受体拮抗剂不仅能抑制此增殖作用,同时CsA亦能显著抑制CD8+ HLA-DR+T细胞分泌TNF-β.

关键词：贫血、再生障碍性、细胞增殖、肿瘤坏死因子类、CD8+HLA-DR+T细胞

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分类号：R4(临床医学)

资助基金：国家自然科学基金30971286;30971285;卫生部卫生行业科研专项201002024;卫生公益性行业科研专项201202017;高等学校博士学科点专项科研基金200800620004;天津市自然科学基金12JCZDJC21500;天津市应用基础及前沿技术研究计划08JCYBJC07800;09JCYBJC11200;天津市卫生局科技攻关项目11KG135

在线出版日期：2012-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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