10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2012.08.017
基质金属蛋白酶9对皮肤成纤维细胞增殖、凋亡和前胶原合成的影响
目的 探讨基质金属蛋白酶9( MMP-9)对皮肤成纤维细胞增殖、凋亡及合成Ⅰ、Ⅲ型前胶原的影响.方法通过0.1、1.0μg/n1脂多糖(LPS)刺激大鼠皮肤成纤维细胞18、48 h建立MMP-9高表达模型;通过RNA干扰(RNAi)技术抑制模型MMP-9的表达.分别观察MMP-9高表达模型和RNAi技术抑制MMP-9表达后成纤维细胞增殖、凋亡和合成Ⅰ、Ⅲ型前胶原的改变.活细胞计数试剂盒(CCK)8检测细胞增殖;流式细胞技术检测细胞凋亡;实时定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达.结果 1.0 μg/ml LPS干预成纤维细胞48 h,MMP-9表达明显高于对照组,mRNA表达量为对照组的14.25倍,蛋白表达量为对照组的2.31倍(均P<0.05).MMP-9高表达模型在抑制MMP-9高表达后MMP-9 mRNA表达量为模型对照组的1/8,蛋白表达量为模型对照组的1/3(均P<0.05).MMP-9表达增高伴有皮肤成纤维细胞增殖减慢[(1.08±0.08)比(1.18±0.09),P<0.05],抑制MMP-9高表达后细胞增殖明显改善[(1.78±0.17)比 (1.53±0.15),P<0.01].MMP-9高表达后成纤维细胞凋亡比例与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),抑制MMP-9高表达后48 h细胞凋亡比例(3.53%±0.22%)低于模型对照组(4.47%±0.46%,P=0.033).MMP-9高表达及抑制高表达后对成纤维细胞Ⅰ型胶原合成均无明显影响(均P>0.05);MMP-9表达增高伴有Ⅲ型前胶原合成减少(P<0.01),但抑制MMP-9高表达后未见Ⅲ型前胶原mRNA表达增多(P>0.05).结论 MMP-9可影响皮肤成纤维细胞增殖等生物学行为.
基质金属蛋白酶9、成纤维细胞、细胞增殖、细胞凋亡、前胶原合成
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R619.6(外科手术学)
国家自然科学基金81070660;广东省自然科学重点资助项目10251008901000010
2012-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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