Aβ阻断肽适配子TRX1-ABAD-DP-TRX2融合基因的克隆及表达

摘要：

目的 将Aβ阻断肽(ABAD-DP) cDNA插入人硫氧化还原蛋白(hTRX)的活化位点,克隆融合基因TRX1-ABAD-DP-TRX2 (T-A-T) cDNA,为基因治疗阿尔茨海默病奠定基础.方法 通过PCR获得目的片段TRX1、TRX2、ABAD-DP,进一步将上述3目的片段按既定顺序插入腺相关病毒穿梭质粒pSSHG-CMV的多克隆位点,从而获得融合基因TRX1 -ABAD-DP-TRX2.经PEI介导Hela细胞包装重组腺相关病毒rAAV/T-A-T.感染NIH-3T3细胞,通过荧光免疫组织化学染色检测融合基因的表达及其与Aβ42的定位.结果 酶切后得到TRX1 -ABAD-DP-TRX2融合基因片段的大小约为435 bp,与理论值一致.荧光免疫组织化学染色检测到融合基因的表达,且共定位组T-A-T和Aβ42均位于NIH-3T3细胞胞质内.结论 成功克隆及表达了Aβ阻断肽适配子TRX1-ABAD-DP-TRX2融合基因,为进一步将阻断肽用于基因治疗阿尔茨海默病提供了基础.

关键词：阿尔茨海默病、适体、核苷、融合基因

所属期刊栏目：92

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30872721;国家自然科学青年基金30801211;30800338;高等学校博士学科点专项科研基金新教师基金200801831073;200801831072

在线出版日期：2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：50-54