不同牵伸载荷对体外培养人肌腱细胞纤维型肌动蛋白的影响

摘要：

目的 探讨不同牵伸载荷条件对体外人肌腱细胞纤维型肌动蛋白(F-actln)的影响,分析不同载荷条件与人肌腱细胞F-actin的变化关系.方法 取5～7代人肌腱细胞加载不同牵伸载荷,其中牵伸强度分别为4%、8%、12%;时间:2、4、8、12、24 h;频率:0.5 H、1.0 Hz.采用罗丹明标记的鬼笔环肽(rhodamine-phalloidin)及DAPI免疫荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜观察F-actin的变化、细胞核固缩及凋亡小体形成;图像分析软件测定单个细胞平均荧光强度并进行单因素方差分析.结果 设定牵伸频率为0 5 Hz、牵伸强度4%,牵伸时间2 h时,人肌腱细胞微丝排列紊乱、模糊;牵伸时间4 h时,微丝增粗、减少,出现断裂呈细颗粒状.设定牵伸频率为0 5 Hz、牵伸时间4 h时,牵伸强度8%微丝解聚、断裂明显,F-actin总体分布减少;牵伸强度12%胞质微丝全部断裂,仅有部分胞膜微丝完整.设定牵伸频率为1.0 Hz,牵伸强度为12%,加载时间分别为2…4 8 12、24 h时,微丝断裂呈递增趋势,牵伸24 h肌动蛋白微丝全部断裂.空白对照组细胞微丝完整荧光强度整体水平最高.牵伸频率固定时,随着牵伸强度递增,微丝的荧光强度呈梯度降低(P＜0.05),且差异有统计学意义;牵伸时间为8 h时,各实验组微丝荧光强度增加,但低于对照组,随着时间的延长,F-actin表达量逐渐降低,24 h时最低,其中,牵伸频率为0 5l-Iz、牵伸强度4%、牵伸时间4 h时,细胞核固缩最明显,凋亡小体形成.结论 不同牵伸载荷条件可引起体外培养的人肌腱细胞F-aetin发生断裂、解聚,F-actin的断裂、解聚与载荷时问及应力强度呈正相关,F-aetin的断裂、解聚诱导了人肌腱细胞生物学行为的改变.

关键词：腱、肌动蛋白类、应力、物理

所属期刊栏目：91

分类号：R692(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

资助基金：国家自然科学基金30872620;81071464;全军医学科研"十一五"计划项目06MB245;重庆市自然科学基金重点项目2011JJ0041

在线出版日期：2011-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1780-1785