10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2011.18.012
应用锁定核酸水解探针实时荧光定量PCR检测烟曲霉
目的 建立检测烟曲霉的锁定核酸(LNA)水解探针实时荧光定量PCR(qPCR)方法.方法 实验菌株来自北京同仁医院临床分离曲霉菌株,均通过形态学和DNA测序方法鉴定到种.实验组:烟曲霉48株;对照组:黄曲霉55株、杂色曲霉16株、构巢曲霉10株、聚多曲霉5株、寄生曲霉1株;l临床标本组:已经纯培养出烟曲霉的冻存临床标本,鼻窦炎鼻窦组织标本20份、肺泡灌洗液1份.提取标本的DNA,LNA水解探针qPCR检测炯曲霉特异性β-微管蛋白基因,评价此方法的分析特异性、扩增效率、线性动态范围和检测限.结果 烟曲霉特异性β-微管蛋白基因LNA水解探针qPCR检测烟曲霉方法的分析特异性为100%,扩增效率为98.2%,线性动态范围6个数量级,检测限2.5pg.结论 烟曲霉特异性β-微管蛋白基因LNA水解探针qPCR法能快速、准确地检测烟曲霉,而且此方法易操作、经济实惠,应用前景广阔.
曲霉、烟、核酸探针、聚合酶链反应
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R446.5(诊断学)
国家自然科学基金30772066
2011-07-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1268-1271