AdMax腺病毒介导c-kit RNA干扰对胃肠间质瘤裸鼠移植瘤株生长的影响

摘要：

目的 构建转导c-kit基因RNA干扰(RNAi)重组AdMax腺病毒,探索一种新的胃肠间质瘤(GIST)治疗手段.方法 合成带有限制性内切酶酶切序列c-kit shRNA.T4 DNA聚合酶作用下,c-kit shRNA插入穿梭质粒PDC316-EGFP-U6,形成PDC316-EGFP-U6-C-KIT.AdMax腺病毒包装系统同源重组生成腺病毒AdEGFP-U6-C-KIT.建立GIST裸鼠异位移植瘤株.实验组与对照组分别给予AdEGFP-U6-C-KIT和空病毒瘤内注射,比较两组瘤株体积、抑瘤率及CD117免疫组化表达差异.结果 琼脂糖电泳证实c-kit shRNA长度约50 bp.PDC316-EGFP-U6-C-KIT测序显示含有目的基因.AdEGFP-U6-C-KIT感染293细胞可见绿色荧光.纯化后重组腺病毒AdEGFP-U6-C-KIT物理滴度为5×1011vp/ml,感染性滴度(TCID50)为1.26×1010 pfu/ml.实验结束时,实验组肿瘤体积平均为(75±23)mm3,对照组平均为(989±31)mm3,差异有统计学意义(P=0.000).实验组抑瘤率为59.6%.CD117阳性表达率实验组为20%,对照组为100%,差异有统计学意义(P=0.001).结论 重组腺病毒AdEGFP-U6-C-KIT可高效转导c-kit RNAi、抑制c-kit基因表达及GIST裸鼠移植肿瘤生长.

关键词：胃肠道间质肿瘤、RNA干扰、原癌基因蛋白质c-kit、腺病毒科、小鼠、裸

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分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助课题20070558266;广东省科技厅基金资助项目2007B031515004;广东省科委基金资助项目2008B060600022

在线出版日期：2011-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：560-563