慢性肾功能衰竭血清对兔主动脉内皮细胞增殖、凋亡及核因子κB信号通路活化的作用

摘要：

目的 探讨慢性肾功能衰竭(CRF)血清对兔主动脉内皮细胞(AEC)增殖、凋亡和核因子κB信号通路活化及其下游炎症因子表达的影响.方法 建立CRF兔模型,采集其血清;不同浓度的CRF血清刺激原代培养的兔AEC后,四甲基偶氮噻唑盐检测细胞增殖,Hoechst33342染色观察细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法分别检测核因子κB、IκB mRNA及蛋白和肿瘤坏死因子(TNF)α蛋白表达;免疫荧光观察核因子κB P65核转位、电泳迁移率变异试验(EMSA)检测核因子κB DNA结合活性;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中TNF-α和白细胞介素(IL)6浓度.结果 (1)在较低浓度(≤10%)时,CRF血清对AEC的增殖有明显的促进作用,但血清浓度继续增加后,对AEC的增殖作用却明显减弱,促凋亡作用却增强,与对照组相比,差异均有统计学意义(均P＜0.01).(2)10%CRF血清刺激后,与对照组相比,核因子κB mRNA(0.35:±0.05比0.26±0.02)及蛋白(1.67±0.15比0.41±0.05)表达均高;IκB mRNA(0.13±0.03比0.24±0.04)和蛋白(0.29±0.06比0.65±0.08)表达均低;核因子κB P65发生核转位;核因子κB DNA结合活性高(均P＜0.01).与对照组相比,10%CRF血清刺激后AEC分泌TNF-α和IL-6高,细胞中TNF-α蛋白表达高(0.37±0.04比0.14±0.03)(均P＜0.01).结论 CRF血清可导致AEC活化,低浓度导致AEC增殖,高浓度导致细胞凋亡;促增殖作用可能与其活化了核因子κB信号通路有关.这为进一步采取措施,防治CRF加速性动脉粥样硬化提供了一定的理论和实验依据.

关键词：肾功能衰竭、慢性、血清、内皮细胞、细胞增殖、NF-κB

所属期刊栏目：90

分类号：R6(外科学)

资助基金：国家自然科学基金30570763

在线出版日期：2010-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2275-2281