10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2009.08.018
DNA甲基转移酶3b对肝癌细胞系中细胞周期素D1基因的表达和启动子甲基化的影响
目的 探讨DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)在人肝癌细胞系(SMMC7721)中对细胞周期素D1(cylin D1)表达及其启动子甲基化水平的影响,并进一步探讨DNMT3b的作用.方法 用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制DNMT3b在SMMC7721细胞系中的表达(实验组),另设转染对照siRNA的对照组,及未加任何处理因素的正常组.用蛋白质印迹检测转染前后DNMT3b及cylin D1蛋白的表达.用噻唑盐(MTT)法检测其生长增殖的变化,并应用甲基化特异性PCR(MSP)技术分别检测实验、对照两组细胞中cylin D1基因启动子区的甲基化状况.结果 DNMT3b siRNA 转染组SMMC7721的生存率(53.7%)与对照组、正常组相比明显降低(P=0.01).蛋白质印迹结果 显示DNMT3b表达水平明显低于对照组和正常组,cylin D1蛋白的表达也低于对照组和正常组.两组中cylin D1启动子区甲基化状态无差异,均未发生甲基化.结论 DNMT3b可以调节cyclinD1的表达,而不改变基因的甲基化状态,可能发挥了转录调控因子的作用.
DNA甲基转移酶3b、细胞周期蛋白D1、RNA、小分子干扰、甲基化
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R73(肿瘤学)
国家自然科学基金30571814
2009-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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