雾化吸入肺内转染人β防御素2基因的实验研究

摘要：

目的 探讨以雾化吸入方式向大鼠气管上皮细胞转染人β防御素2基因(hBD2)的可行性.方法 薄膜法制备新型阳离子脂质体,并按不同重量比与pLXSN-hBD2重组质粒混合构成脂质体/质粒复合物.将筛选出的适当重量比的脂质体/质粒复合物以雾化吸入方式对大鼠进行肺内转染(实验组,n=11);对照组(n=5)转染空白载体pLXSN.以PCR法和蛋白质印迹法检测雾化吸入后大鼠气管上皮细胞中hBD2的表达.结果 雾化后不同重量比脂质体/质粒复合物的微囊结构均受到明显影响,以10:1者结构破坏最小,更适于雾化.PCR检测显示雾化吸入后2组大鼠气管上皮细胞基因组DNA中均整合入相应质粒.蛋白质印迹法检测显示实验组大鼠转染后2 d气管上皮细胞hBD2蛋白表达量最高(4866.9±148.2),随时间延续而逐渐降低,21 d表达量为3.2±1.5;而对照组无hBD2蛋白表达.结论 新型阳离子脂质体雾化后具有转染活性,pLXSN-hBD2重组质粒能通过雾化吸入方式转染大鼠气管上皮细胞并获得表达,并且hBD2蛋白的表达能持续一段时间.

关键词：β防御素、脂质体、转染、上皮细胞、吸入法

所属期刊栏目：88

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30270592

在线出版日期：2008-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1424-1428