结核分枝杆菌异柠檬酸裂合酶对耻垢分枝杆菌胞内存活的影响及相关机制

摘要：

目的 明确结核分枝杆菌(MTB)异柠檬酸裂合酶(ICL)对耻垢分枝杆菌(MS)在巨噬细胞内存活的影响,并初步探讨其可能的机制.方法 构建MTB-icl基因的穿梭表达质粒pUV15-icl,电转化法导入MS中后检测MTB-ICL在MS中的表达.分别用rMS-pUV15-icl和rMS-pUV15感染鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,于感染一定时间后测定细胞内存活的细菌数,评价MTB-ICL对MS在巨噬细胞内存活的影响.分别留取上述两组巨噬细胞的培养上清液,检测干扰素γ(IFN-γ)和一氧化氮(NO)的水平,同时采用原位TUNEL技术检测两组巨噬细胞的凋亡水平,探讨MTB-ICL对MS在巨噬细胞内存活影响的可能机制.结果 RT-PCR、Western印迹和荧光显微镜检测结果证实MTB-ICL可在MS中有效表达.与rMS-pUV15比较,rMS-pUV15-icl在巨噬细胞内的存活率明显高(P＜0.01),感染后24 h和48 h,其菌落数分别为(32.78±2.90)×103和(23.33 ±2.34)×103,而rMS-pUV15菌落数分别为(14.67±2.45)×103和(2.28 ±0.25)×103.MTB-ICL对巨噬细胞产生IFN-γ和NO没有明显影响.原位凋亡检测结果显示,与rMS-pUV15感染组比较,rMS-pUV15-icl感染组巨噬细胞的凋亡水平明显下降.结论 MTB-ICL可促进MS在巨噬细胞内的存活,其机制之一可能是抑制宿主巨噬细胞的凋亡.

关键词：异柠檬酸裂合酶、分枝杆菌、结核、耻垢、巨噬细胞、凋亡

所属期刊栏目：88

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30600528

在线出版日期：2008-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：551-554