基质金属蛋白酶-2和-9基因同时沉默抑制喉癌侵袭生长的实验研究

摘要：

目的 探讨重组慢病毒介导的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因同时沉默对喉鳞癌侵袭生长的抑制作用.方法 采用核糖核酸(RNA)干扰技术,运用MMP-2和MMP-9基因小于扰RNA(siRNA)的重组慢病毒(MMP-2-RNAi-lentivirus,MMP-9-RNAi-lentivirus)共同转导喉鳞癌Hep-2细胞,并运用逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测Hep-2细胞MMP-2和MMP-9基因的表达.通过Boyden小室实验观察MMP-2-RNAi-lentivirus和MMP-9-RNAi-lentivirus重组慢病毒转导对喉癌细胞侵袭能力的影响.构建喉癌移植瘤模型,将MMP-2-RNAi-lentivirus和MMP-9-RNAi-lentivirus重组慢病毒瘤内注射,观察抑瘤效果.运用免疫组化方法检测移植瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,评估其对细胞增殖的影响.结果 重组慢病毒MMP-2-RNAi-lentivirus和MMP-9-RNAi-lentivirus能高效地转导入靶细胞.RT-PCR检测显示,转导后的Hep-2细胞中MMP-2和MMP-9表达阴性.侵袭实验显示,实验组Hep-2细胞中穿过人工基底膜的细胞数为(14±4)个,明显少于空载体对照组的(32±6)个(P＜0.01).体内实验显示,MMP-2-RNAi-lentivirus和MMP-9-RNAi-lentivirus重组慢病毒瘤内注射后,裸鼠移植瘤平均重量和平均体积明显小于对照组,抑瘤率为46.59%,PCNA指数也明显降低.结论 慢病毒介导的MMP-2和MMP-9基因共同沉默能有效的抑制喉癌的侵袭,生长及增殖.

关键词：慢病毒属、喉肿瘤、基质金属蛋白酶

所属期刊栏目：88

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30540010;中国博士后科学基金20070410920;黑龙江省青年基金QC06C054;黑龙江省海外学人科研项目1151hz029

在线出版日期：2008-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：36-39