人酪氨酸酶抗原表位肽的表达、纯化及在白癜风患者中的抗原性检测

摘要：

目的 表达人酪氨酸酶抗原表位肽,探讨其在白癜风患者自身抗体检测中的应用.方法 目的基因合成后克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌BL21菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析和Western印迹鉴定目的蛋白表达,以此蛋白为抗原,检测100例进展期白癜风患者和30名正常人血清IgG抗体情况.结果 成功构建重组表达载体,重组蛋白成功表达.应用凝胶分析系统分析蛋白表达量发现,目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的70%.融合蛋白经过谷胱苷肽S-转移酶试剂盒纯化后,其蛋白纯度达90%以上.100例白癜风患者中64例血清与目的蛋白结合反应呈阳性,30名正常人血清结合反应均呈阴性.结论 成功表达了人酪氨酸酶抗原表位肽,其在白癜风患者血清中具有抗原性.

关键词：白癜风、一元酚单氧酶、抗原、表位

所属期刊栏目：87

分类号：R75(皮肤病学与性病学)

资助基金：浙江省科技厅资助项目2005C33017

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2408-2411