抗增殖蛋白抑制转化生长因子-β1诱导的肾脏成纤维细胞增殖和表型改变

摘要：

目的 研究抗增殖蛋白(prohibitin,PHB)在肾间质纤维化发生中的作用.方法 (1)检测48例原发性肾小球肾炎患儿肾组织中PHB蛋白表达,并比较其与肾小管间质损伤程度的相关性.(2)观察PHB在大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)中亚细胞定位,以Western印迹和RT-PCR测定NRK-49F受到转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后PHB表达的变化.(3)构建PHB表达质粒并转染,观察PHB对NRK-49F细胞周期以及表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白质和mRNA的影响.结果 (1)PHB蛋白主要表达于肾间质细胞和肾小管上皮细胞的胞质,随肾小管间质损伤程度加重而逐渐减弱(组间比较,均P＜0.01),PHB表达量与肾小管间质损伤程度显著负相关(r=-0.802,P＜0.01).(2)激光共焦显微镜下见PHB主要分布于NRK-49F的细胞质,细胞核亦有较弱表达.TGF-β1刺激后PHB蛋白和mRNA表达均下调,呈现时间和剂量依赖关系(组间比较,P＜0.01).(3)成功构建PHB真核表达质粒,转染48h细胞中PHB蛋白量升高约2.54倍(与未转染组比较,P＜0.01).(4)转染PHB基因明显抑制TGF-β1所诱导的细胞增殖,使更多的细胞处于G0/G1期(与TGF-β1组比较,P＜0.01),而对未受刺激的细胞无影响(P＞0.05).(5)转染PHB基因明显抑制TGF-β1所诱导的α-SMA蛋白质和mRNA表达(与TGF-β1组比较,P＜0.01),而对α-SMA基础表达无影响(与TGF-β1组比较,P＞0.05).结论 PHB在肾组织中的表达水平可以反映肾小管间质损伤程度,外源性PHB显著抑制TGF-β1诱导的成纤维细胞增殖和表型改变.

关键词：转化生长因子β、成纤维细胞、表型、抗增殖蛋白

所属期刊栏目：87

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30270619

在线出版日期：2007-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1660-1665