分化抑制因子1在环氧合酶2介导的胃癌血管生成中的作用及机制研究

摘要：

目的 验证分化抑制因子1(Id-1)在环氧合酶2(COX-2)介导的胃癌血管生成中的作用及机制.方法 建立高表达COX-2和表达COX-2特异性siRNA的胃癌SGC7901细胞,通过Western印迹和逆转录PCR方法检测两种亚细胞系中Id1的表达,ELISA方法分析两种细胞上清中血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异.通过四唑盐比色(MTT)实验分析两种细胞亚系的上清对体外脐静脉内皮细胞(HU-LT)增殖的影响,并在SGC7901/COX-2中抑制Id1后观察培养上清中VEGF的变化以及对脐静脉内皮细胞(HU-LT)增殖的影响.裸鼠成瘤实验观察转染细胞的成瘤性及肿瘤新生微血管密度(MVD).结果 成功建立高表达COX-2以及表达特异性COX-2小干扰RNA(siRNA)的稳定克隆,并鉴定了不同克隆的转染效率.高表达COX-2的胃癌SGC7901细胞中Id1的蛋白及mRNA表达水平增高,而转染COX-2-siRNA的SGC7901细胞中Id1的表达则均低于对照组.COX-2高表达的SGC7901/COX-2细胞上清中VEGF的蛋白含量高于对照组(2060±42 vs 1248±28,P=0.000),而SGC7901/COX-2-siRNA细胞上清中VEGF的蛋白含量低于对照组(1024±20,2033±27 vsP=0.000).在SGC7901/COX-2细胞条件培养基中,HU-LT细胞生长较对照组快;在SGC7901/COX-2-SiRNA细胞条件培养基中,HU-LT细胞生长较对照组缓.在SGC7901/COX-2中抑制Id1后,培养上清中VEGF的含量增加以及对HU-LT促进增殖的作用均被逆转.裸鼠成瘤试验显示抑制Id1后SGC7901/COX-2细胞成瘤性降低[(353±12)mg vs(1020±91)mg,P=0.038],MVD降低(8.8±1.6vs 20±1.7,P=0.001).结论 COX-2可以上调SGC7901细胞中Id1的表达,并通过此途径影响内皮细胞的体外增殖能力.因此在胃癌发生发展中Id1参与了COX-2所介导的促血管生成过程,有可能成为胃癌抗血管治疗的新靶标.

关键词：胃肿瘤、环氧化合物、血管生成

所属期刊栏目：87

分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2007-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1570-1575