泛素连接酶pirh2短发夹状RNA对肺癌细胞生长抑制的实验研究

摘要：

目的 研究pirh2对肺癌生长的影响.方法 采用免疫组织化学法检测pirh2在肺癌组织中的表达;构建靶向pirh2基因的短发夹状RNA(shRNA)干扰质粒(psiRNA-Pirh2A和psiRNA-Pirh2B),并设计阴性对照(psiRNA-Con)组和空质粒(psiRNA-hH1)组,转染A549细胞;实时定量PCR和免疫印迹法分别检测pirh2的mRNA和蛋白的表达.CCK-8法检测A549细胞的增殖;参考CCK-8结果,选取抑制作用较强的一个pirh2干扰质粒进行裸鼠成瘤实验.结果 53例肺癌组织中有42例pirh2阳性(79.2%);psiRNA-pirh2A及psiRNA-pirh2B组细胞生长均慢于正常组(q值分别为6.82、5.63,均P＜0.05),而psiRNA-Con和psiRNA-hH1组细胞增殖能力差异无统计学意义.正常对照、阴性对照和干扰组裸鼠肿瘤组织重量分别为1.66 g±0.21 g、1.48 g±0.34 g和0.59 g±0.16 g,正常组与阴性对照组之间差异无统计学意义,而干扰组肿瘤重量明显低于正常组,差异有统计学意义(t=6.27,P＜0.05).结论 pirh2过度表达可能是肺癌发生过程中一个重要的环节,成功构建的shRNA表达载体可特异性抑制其在A549细胞中的表达,并在体内外抑制肺癌细胞的生长.

关键词：RNA、蛋白质p53、肺肿瘤、泛素-蛋白酶体途径

所属期刊栏目：87

分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1199-1203