人网膜前脂肪细胞原代培养及其生物学特性研究

摘要：

目的 建立人网膜前脂肪细胞原代培养的方法,研究内脏脂肪增生肥大和内分泌功能的生物学特性.方法 选取人网膜脂肪组织,采用酶消化细胞原代培养出梭形细胞,对培养细胞进行形态学观察、MTT法测定生长曲线、油红O脂肪染色法进行脂肪细胞鉴定、酶联免疫法测定脂肪细胞因子瘦素和脂联素水平.结果 培养出的梭形细胞成分均一.第3天开始增殖,4～9 d为指数增长期,倍增时间约为60 h.经分化诱导21 d约有90%的细胞分化为成熟脂肪细胞.前脂肪细胞可检出低水平瘦素分泌,经诱导分化分泌量持续增多,第17天达峰值(1.6 ng·ml-1·24 h-1),之后保持高分泌状态至诱导结束;而脂联素直到诱导分化第7天始可检测到低水平分泌,此时光镜下已可见胞质含脂滴的细胞;7～17 d分泌逐渐增多,第17天分泌达峰值(99 ng·ml-1·24 h-1),之后有明显下降趋势.经油红O脂肪染色和瘦素、脂联素分泌检测证实分离培养的细胞为功能活跃的前脂肪细胞.结论 成功建立了人网膜前脂肪细胞模型,观察到瘦素和脂联素不同分泌模式.脂联素可作为鉴定前脂肪细胞分化成熟的内分泌功能特异标志物.

关键词：前脂肪细胞、原代培养、瘦素、脂联素

所属期刊栏目：87

分类号：R3(基础医学)

资助基金：卫生部专项基金2001-162;北京市科技新星计划项目2004A27

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：838-841