E2F"诱骗"策略抑制膀胱出口梗阻后逼尿肌细胞的表型转化

摘要：

目的 利用自建的膀胱出口梗阻(BOO)细胞水平的模型,探讨转录因子E2F"诱骗"(decoy)策略抑制逼尿肌细胞(DSMC)的表型转化作用.方法 对培养的DSMC施加周期性张力负荷以建立细胞水平的BOO模型;以Lipofectamine 2000介导E2F-decoy脱氧寡核苷酸(ODN)转染DSMC,设立E2F-decoy ODN转染组(Decoy组),错配E2F-decoy ODN转染组(Mis-decoy组)及空白对照组(非转染组);四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞的增殖活性,逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)分析增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA表达水平,Western印迹检测PCNA和细胞周期依赖性蛋白激酶cdk2表达.结果 Lipofectamine介导转染E2F-decoy ODN后24 h可获得表达;Decoy组增殖活性显著低于非转染组和Mis-decoy组(均P＜0.01);Decoy组PCNA mRNA表达显著低于非转染组(P＜0.01);Decoy组PCNA和cdk2蛋白表达显著低于非转染组(126±14 vs 180±10;155±6 vs210±22,均P＜0.01);而Mis-decoy组与非转染组之间以上指标差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 E2F-decoy ODN能够转染DSMC并获得表达;转录因子E2F"诱骗"策略有效抑制了BOO后DSMC的表型转化,显示了从逼尿肌结构的角度改善梗阻后膀胱功能的前景.

关键词：膀胱颈梗阻、表型、转录因子、逼尿肌

所属期刊栏目：87

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30300350;浙江省医学会临床科研基金2006ZYC06

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：829-832