HEK293细胞上表达的人类超极化激活环核苷酸门控钾通道亚型2和亚型4的电生理

摘要：

目的 将人类超极化激活环核苷酸门控钾通道亚型2(hHCN2)和亚型4(hHCN4)的基因表达于HEK293细胞系上,观察其表达的通道的电生理特点.方法 包含目的 基因hHCN2或hHCN4的cNDA亚克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,穿梭载体和病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌重组,病毒经过包装和扩增后分别转染HEK293细胞.利用全细胞膜片钳技术,记录分别转染了hHCN2和hHCN4的HEK293细胞上的超极化激活钾电流(If).结果 转染hHCN2和hHCN4的HEK293细胞上产生超极化激活的内向电流.两种通道的半数最大激活电压分别为-114.8 mV±3.3 mV和-125.9 mV±2.9 mV,反向曲线斜率分别为11.1 mV±1.2 mV和13.7 mV±1.3 mV.两者的激活动力学明显不同,刺激电压为-110 mV时,通道的激活时间常数分别为0.99 s±0.21 s和8.47 s±2.85 s.两种通道对钠离子和钾离子的相对通透性分别为0.40和0.34.两种电流均可被2mmol/L的氯化铯(CsCl)阻断.结论 目的 基因hHCN2和hHCN4在HEK293细胞上成功表达,形成的两种通道具有明显不同的激活动力学.

关键词：超极化激活环核苷酸门控钾通道、人类、全细胞记录

所属期刊栏目：87

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：706-709