10.3760/j:issn:0376-2491.2007.06.015
生存素反义寡核苷酸诱导膀胱癌细胞凋亡及增强其化疗敏感性
目的 探讨生存素反义寡核苷酸(生存素-ASODN)对化疗药多西紫杉醇(泰索帝)诱导膀胱癌细胞系BIU87细胞凋亡的影响.方法 将已构建成功的生存素-ASODN真核表达载体pcDNA3-SVVas通过脂质体介导转染膀胱癌细胞系BIU87,并筛选转染成功的阳性克隆;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其生存素mRNA表达;锥虫蓝拒染法观察生存素-ASODN与泰索帝联合应用对BIU87细胞生存的影响;细胞计数和四甲基偶氮唑盐(MTT)试验测定转染细胞对泰索帝敏感性;琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA断裂情况;核染色检测凋亡细胞的细胞核的变化;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 转染生存素-ASODN真核表达载体pcDNA3-SVVas的BIU87-SVVas细胞生存素mRNA表达水平下降、细胞增殖明显受抑,与转染pcDNA3空载体BIU87-neo细胞、未转染载体的BIU87细胞进行比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);经琼脂糖凝胶电泳,BIU87-SVVas细胞可见到DNA梯形条带,而其他对照组未见到;与BIU87-neo、BIU87细胞相比,BIU87-SVVas细胞的细胞核呈致密浓染;加入泰索帝的BIU87-SVVas细胞组的凋亡率大幅度增加.结论 生存素-ASODN可促进泰索帝诱导BIU87细胞凋亡及增加其对泰索帝的敏感性,为膀胱癌的生物学治疗研究奠定了实验基础.
膀胱肿瘤、生存素、反义核酸、泰索帝
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R73(肿瘤学)
国家自然科学基金30070325
2007-04-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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