抑制核小体结合蛋白1基因对人前列腺癌细胞LNCaP增殖的作用

摘要：

目的 利用RNA干扰(RNAi)技术,探讨核小体结合蛋白1(NSBP1)基因对人激素依赖前列腺癌细胞系LNCaP增殖的作用.方法 设计并合成针对NSBP1的4种小分子干扰RNA(siRNA)(包含1种阴性对照),构建能抑制NSBP1 mRNA表达的重组pSilencer 2.1-U6 neo质粒,转染LNCaP细胞.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹实验检测不同质粒对NSBP1表达的抑制效率,选取抑制效率最高的质粒转染LNCaP细胞,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖活性,用流式细胞光度术检测细胞周期的变化.结果 筛选出抑制效率最高的质粒pSilencer-81(mRNA水平抑制80%,蛋白水平抑制85%),与阴性对照pSilencer-Neg质粒分别转染LNCaP细胞.转染60 h后,经过84 h、108 h,一直到132 h,LNCaP/81细胞A值(代表细胞活性)低于LNCaP/Neg细胞A值,差异均有统计学意义(t=4.501,4.282,5.229,4.759,均P＜0.05).抑制率随时间延长而增加,在84 h有所降低,在108 h达最大值30.2%.转染60 h后,经过84 h,一直到108 h,LNCaP/81细胞的G2M+S期细胞百分率较LNCaP/Neg细胞的降低,差异均有统计学意义(t=3.705,3.887,8.220,均P＜0.05).结论 针对NSBP1的siRNA通过抑制前列腺癌LNCaP细胞中NSBP1基因的表达,能明显抑制细胞的增殖,NSBP1可能参与前列腺癌细胞生长增殖过程.

关键词：前列腺肿瘤、载体蛋白质类、RNA、高速泳动族蛋白

所属期刊栏目：87

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30371420;30672099

在线出版日期：2007-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：404-408