野生型与Pro370Leu突变型myocilin基因真核细胞表达的对比研究

摘要：

目的比较Pro370Leu突变型myocilin(mMYOC)与野生型myocilin(wMYOC)基因在真核细胞中表达的差别,了解原发性开角型青光眼(POAG)的发病机制.方法将携带有wMYOC基因的绿色荧光蛋白重组表达载体pEGFP-N3-wMYOC和携带有mMYOC基因的红色荧光蛋白重组表达载体pDsRed2-N1-mMYOC,分别及共同转染真核细胞Hela,用荧光显微镜观察蛋白表达定位情况,并用Western 印迹分析蛋白分泌情况.结果荧光显微镜观察到wMYOC蛋白和mMYOC蛋白均成功表达,都定位在细胞质中,但wMYOC蛋白分布均匀,而mMYOC蛋白呈聚集状态.共表达时,wMYOC蛋白也呈聚集状态,且与mMYOC蛋白有共定位倾向.经Western印迹分析,相应的转染细胞可分泌wMYOC蛋白,而不能分泌mMYOC蛋白;当共表达时,也没有wMYOC蛋白分泌.结论两种基因都能成功表达,都定位在细胞质;mMYOC蛋白表现为聚集倾向和分泌障碍,并且影响wMYOC蛋白的表达和分泌特性.

关键词：青光眼、转染、质粒、基因、MYOC

所属期刊栏目：86

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2006-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共15页

页码：690-704