siRNA特异性抑制卵巢癌细胞生长因子受体-2基因表达及其意义的研究

摘要：

目的探讨RNA干扰(RNAi)抑制卵巢癌细胞表皮生长因子受体-2(HER-2)基因的表达及其细胞效应.方法实验分为以下3组:空白对照组(未经转染的人卵巢癌SKOV-3细胞)、转染非特异性的siRNA组及转染特异性的siRNA组.干涉后5 d加顺铂.采用半定量PCR技术(RT-PCR)和Western印迹法检测HER-2 mRNA和蛋白的表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡, 用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞对顺铂的化学敏感性的变化,分析观察细胞生物学特性的改变.结果 HER-2 siRNA 对HER-2 mRNA表达明显抑制,作用能持续10 d左右;干涉第7天后开始出现蛋白质表达的明显减弱,转染特异性siRNA组的蛋白质阳性表达率为(25.5±0.8)%,非特异性siRNA组为(95.7±0.8)%,空白对照组为(96.6±1.2)%,前组与后两组比较差异有统计学意义(均P<0.001).干涉后随着HER-2 mRNA表达下降,细胞凋亡增加,第6天凋亡率最高,达(53.2±1.0)%, 转染非特异性siRNA组为(4.1±0.3)%,空白对照组为(4.1±0.3)%,差异有统计学意义(P<0.001);干涉后,转染特异性siRNA组的细胞存活率为 (58.4±0.8)%,转染非特异性siRNA组为(68.0±0.6)%,空白对照组为(67.0±0.3)%,前组与后两组比较差异有统计学意义(均P<0.001).结论体外合成的siRNA能有效抑制SKOV-3细胞中HER-2表达,促进细胞的凋亡,提高细胞对顺铂的敏感性,RNAi为卵巢癌的基因治疗提供了一种新策略.

关键词：受体、生长因子、卵巢肿瘤、顺铂

所属期刊栏目：86

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：辽宁省科技基金2001225001-13;辽宁省沈阳市科技计划200241

在线出版日期：2006-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：619-623