10.3760/j:issn:0376-2491.2006.02.005
p53抑制剂PFT-α对热化疗损伤结肠上皮细胞增殖和凋亡的影响
目的探讨p53抑制剂PFT-α(PFT-α)对结肠上皮细胞增殖、周期的影响及周期调控机制.观察PFT-α对热化疗损伤结肠上皮细胞的影响.方法运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察不同浓度PFT-α对结肠上皮细胞增殖的影响.顺铂联合温热处理原代培养结肠上皮细胞30 min,对比加入不同浓度PFT-α后,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)染色,流式细胞仪检测细胞凋亡,PI染色检测细胞周期.Western印迹检测结肠上皮细胞细胞周期蛋白(cyclin)B1和Cdc2(Tyr15)表达.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测结肠上皮细胞cyclinB1 mRNA的表达变化.结果 PFT-α在低于50 μmol/L时对结肠上皮细胞增殖无任何影响,高于60 μmol/L则对该细胞的增殖产生抑制效应(10、20、30、40 μmol/L的PFT-α,对细结肠上皮细胞的凋亡率分别为14.8%±1.5%、9.7%±1.2%、6.1%±1.3%、3.8%±0.3%).不同浓度PFT-o作用于热化疗处理的结肠上皮细胞后,细胞凋亡率下降且呈剂量依赖性.流式细胞仪细胞周期分析显示在运用PFT-α后,结肠上皮细胞的G2/M延长,cyclinB1和Cdc2(Tyr15)蛋白表达随PFT-α的剂量升高而逐渐增强.结论 PFT-α可能通过促进cyclinB1蛋白和mRNA表达,Cdc2(Tyr15)磷酸化水平升高,降低cyclinB1/Cdc2活性,细胞停滞于G2/M期,减轻热化疗对结肠上皮细胞的损伤而发挥保护效应.
基因、抑制、结肠、上皮细胞、高温、诱发、PFT-α
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R73(肿瘤学)
2006-04-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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