乙型肝炎病毒 P区RNA干扰抑制2.2.15细胞乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原分泌的实验研究

摘要：

目的观察针对乙型肝炎病毒(HBV)P区基因的RNA干扰(RNAi)表达载体pGE-HBVP在HepG2.2.15(2.2.15)细胞中抑制HBV表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的分泌效应,以阐明HBV P区小干扰RNA(siRNA)抑制HBV复制和蛋白表达的影响.方法构建并鉴定pGE-HBVP,将此载体转染至完整HBV复制模型2.2.15细胞,用化学发光免疫检测法检测并分析转染后不同时间段细胞培养上清中HBsAg和HBeAg的含量变化,并用免疫细胞化学方法观察转染后细胞中HBsAg的表达变化.结果成功构建了5个针对HBV P区的RNAi表达载体pGE-HBVP1～pGE-HBVP5,其中pGE-HBVP1和pGE-HBVP2具有明显的HBsAg和HBeAg分泌抑制效应和表达抑制效应.抑制率最高的pGE-HBVP2在转染2.2.15细胞效率为30%～40%的基础上,转染后24、48、72和96 h培养上清中的HBsAg分泌抑制率分别为28.88%、32.28%、29.10%和18.42%,HBeAg的分泌抑制率分别为38.33%、27.50%、33.41%和12.60%.细胞免疫细胞化学结果显示,pGE-1空载体转染后2.2.15细胞的HBsAg的表达阳性率约为82%,而pGE-HBVP2转染后2.2.15细胞的HBsAg的表达阳性率约为50%,和pGE-1空载体相比阳性率显著下降.结论针对HBV P区的RNAi可以抑制HBV病毒抗原的分泌和表达.

关键词：肝炎病毒、乙型、质粒、转染、基因表达

所属期刊栏目：85

分类号：R5(内科学)

在线出版日期：2006-01-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3079-3083