单克隆抗体检测广州管圆线虫循环抗原的研究

摘要：

目的制备抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体,用于广州管圆线虫循环抗原(CAg)的检测.方法广州管圆线虫成虫可溶性抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫印迹试验对所获得的细胞克隆进行筛选和鉴定,双抗体(单抗3F1和4H2)夹心ELISA法检测实验感染广州管圆线虫大鼠、小鼠和广州管圆线虫病人血清中的CAg.结果获得了3株稳定分泌抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单抗的杂交瘤细胞株,经鉴定2株为IgG1(3F1、4H2),1株为IgM(2A2),杂交瘤细胞培养上清效价分别为1: 25 600、1: 25 600和1: 12 800,诱生腹水ELISA效价分别为1: 80 000、1: 80 000和1: 40 000.3株单抗均识别广州管圆线虫成虫相对分子量约为15 000的蛋白.实验感染广州管圆线虫大鼠、小鼠血清CAg检出率分别为84.2%(48/57)和87.2%(41/47),广州管圆线虫病人血清CAg检出率为86.4%(19/22),与日本血吸虫、囊虫、肺吸虫、旋毛虫病人血清无交叉反应.实验感染小鼠血清CAg第2周即呈阳性反应,第4周A450值达到高峰.结论建立了敏感性高、特异性强的3F1、4H2双抗体夹心ELISA检测广州管圆线虫循环抗原法,可用于广州管圆线虫病的临床诊断、疗效考核和流行病学调查.

关键词：管圆线虫、广州、抗体、单克隆、抗原、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：85

分类号：R3(基础医学)

资助基金：浙江省科技计划2003C33015

在线出版日期：2006-01-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3057-3061