VP22增强人巨细胞病毒pp65核酸疫苗在小鼠体内免疫活性的实验研究

摘要：

目的构建人巨细胞病毒(HCMV)主要被膜磷蛋白pp65(HCMV pp65)基因高表达载体以及VP22.pp65联合表达载体,并评价VP22增强pp65核酸疫苗的体内免疫效果.方法 8周龄正常BALB/C雌性小鼠分为pcDNA3.pp65组、pVP22.pp65组、实验对照组,每组7只.利用分子克隆技术构建HCMV pp65表达载体pcDNA3.pp65、VP22与pp65融合基因载体pVP22.pp65,免疫小鼠,四甲基偶氮唑蓝法测定T淋巴细胞增殖反应、白细胞介素(IL)-2生物学活性,乳酸脱氢酶释放法测定自然杀伤细胞(NK)活性,酶联免疫吸附实验测定血清HCMV IgM、IgG抗体含量、血清及脾细胞培养液中的IL-2、IL-4含量.结果小鼠的一般状况始终良好,成功构建了HCMV核酸疫苗载体pcDNA3.pp65、pVP22.pp65;免疫小鼠后,两种疫苗T淋巴细胞增殖反应(8周时刺激指数分别为5.11和5.55)和NK细胞活性(12周分别为8.74%和12.08%)及HCMV IgM(6周时A值分别为1.20和1.58)、IgG抗体(6周时A值分别为1.09和1.78)均高于对照组,且pVP22.pp65组高于pcDNA3.pp65组(P<0.05).小鼠血清中IL-2和IL-4含量及IL-2的生物学活性较低,各组间差异无统计学意义(均P>0.05);小鼠脾细胞上清中IL-2和IL-4含量以pVP22.pp65组(411.11 pg/ml、76.10 pg/ml)最高,IL-2生物学活性也以pVP22.pp65组(A值为0.22)最高.结论 HCMV核酸疫苗无毒性.pp65核酸疫苗可诱导机体较强的免疫反应,VP22可大大增强pp65核酸疫苗的体内免疫效果.

关键词：巨细胞病毒疫苗、疫苗、DNA、免疫活性

所属期刊栏目：85

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30070321

在线出版日期：2005-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1049-1052